[发明专利]与小麦抗条锈病基因QYr.sicau-1B-1连锁的SNP分子标记与应用有效
| 申请号： | 201910134070.9 | 申请日： | 2019-02-22 |
| 公开（公告）号： | CN109706263B | 公开（公告）日： | 2022-04-05 |
| 发明（设计）人： | 马建;兰秀锦;秦娜娜;郑有良;魏育明;江千涛;陈国跃;刘亚西 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;陈征 |
| 地址： | 625014 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 小麦 条锈病 基因 qyr sicau 连锁 snp 分子 标记 应用 | ||
1.用于检测小麦抗条锈病的SNP分子标记的特异性引物组合，其特征在于，含有核苷酸序列如SEQ ID NO.1~3所示的引物。
2.含有权利要求1所述特异性引物组合的试剂盒。
3.权利要求1所述的特异性引物组合或权利要求2所述的试剂盒在鉴定抗条锈病小麦中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，以待测植株样品的基因组DNA作为模板，用如SEQ ID NO.1~3所示的荧光定量PCR引物进行荧光定量PCR扩增，利用扩增结果进行基因型分型，将能够读取到引物SEQ ID NO.2所修饰的荧光的植株鉴定为具有抗条锈病性状的小麦资源。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述荧光定量PCR的扩增反应体系：5 µLMaster Mix， 3条引物SEQ ID NO.1、2和3按照10ng/µL的浓度，分别加入120µL、 120µL和300µL并添加ddH2O 460µL进行混合后作为混合引物使用，1.4µL混合引物、5ng模板DNA、双蒸水加至总量为10µL，同时需添加至少3个独立的以双蒸水代替DNA模板的空白；
荧光定量PCR程序：94℃预变性15min；94℃变性20s、61℃复性/延伸60s，共10个循环；94℃变性20s、55℃复性/延伸60s，共26个循环；
获得的结果进行基因分型；检测PCR扩增产物荧光，如果能够读取引物SEQ ID NO.2所修饰的荧光，则待测植株为具有抗条锈病性状的小麦资源。
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