[发明专利]一种巨噬细胞载药微颗粒制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种巨噬细胞载药微颗粒制剂及其制备方法，巨噬细胞载药微颗粒制剂包括细胞囊泡和包裹在细胞囊泡内的药物小分子有效成分，细胞囊泡源自于甘露糖修饰的巨噬细胞凋亡所释放。本发明提供的载药微颗粒更有利于在肿瘤组织高度富集、及更易被M2型肿瘤相关巨噬细胞摄取，提高小分子药物对M2型肿瘤相关巨噬细胞的逆极化效果，改善肿瘤微环境，增强对肿瘤细胞的杀伤，能够解决小分子药物无法在肿瘤部位有效富集和靶向并逆极化M2型肿瘤相关巨噬细胞的问题，同时降低了小分子药物对机体的毒副作用。

技术领域

本发明属于药物靶向载体技术领域，更具体地，涉及一种巨噬细胞载药微颗粒制剂及其制备方法，尤其是一种提高小分子药物的肿瘤富集与被M2型肿瘤相关巨噬细胞靶向摄取与逆极化的纳米载药系统的制备与用途。

背景技术

肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associated macrophages，TAM)占实体肿瘤质量的50％左右，是肿瘤微环境的重要组成部分，是引起肿瘤微环境免疫抑制的重要原因之一。大量研究表明，M2型肿瘤相关巨噬细胞能够促进肿瘤生长、血管生成、转移、耐药和免疫抑制，发挥促肿瘤作用。与此相反，M1型肿瘤相关巨噬细胞具有更强的肿瘤细胞吞噬能力，能够分泌IL-12和TNF-α等促炎细胞因子、释放活性氧，有效杀伤肿瘤细胞，在抗肿瘤免疫反应中发挥重要作用。因此，将M2型肿瘤相关巨噬细胞逆极化成M1型，恢复其抗肿瘤能力，是肿瘤免疫治疗的一个重要途径。

纳米材料因其独特的理化特性和靶向修饰性等，在靶向药物输送方面具有明显优势。相对于人工合成的纳米药物载体可能具有的生物相容性差等问题，利用细胞或细胞来源的囊泡用作药物载体引起广泛关注。巨噬细胞在体内受到肿瘤微环境中细胞因子、趋化因子等多种信号的诱导，能够被招募至肿瘤组织。因此，巨噬细胞作为药物载体具有天然的肿瘤组织靶向性和深部穿透能力。但是，巨噬细胞负载的药物会影响巨噬细胞活性从而导致其药物传递效率下降。而且，被招募至肿瘤组织的巨噬细胞在肿瘤微环境的诱导下有可能会转变为M2型肿瘤相关巨噬细胞，有促进肿瘤生长的风险。因此，十分有必要寻找替代巨噬细胞的药物载体。

目前，细胞来源的胞外囊泡作为药物载体已引起关注。这种天然生物来源的囊泡具有低免疫原性、优良的体内长循环特性及较高细胞靶向性等特点。作为一类重要的胞外囊泡，微颗粒(Microparticles，MPs)是细胞在相关信号的刺激下触发细胞膜下的骨架变化，导致细胞膜在局部向外膨出，包裹细胞内容物，并以囊泡的形式释放到细胞外所产生的，其粒径在100-1000nm。巨噬细胞来源载药微颗粒能够被巨噬细胞摄取，有效递送小分子药物，逆转巨噬细胞极性。但是，这种巨噬细胞载药微颗粒不能够有效靶向并逆极化M2型巨噬细胞，影响了其对肿瘤的免疫治疗效果。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术中存在的药物小分子无法在肿瘤部位有效富集和靶向并逆极化M2型肿瘤相关巨噬细胞的问题，提供一种巨噬细胞载药微颗粒制剂及其制备方法。

本发明采用如下技术方案：

一种巨噬细胞载药微颗粒制剂，包括细胞囊泡和包裹在所述细胞囊泡内的药物小分子有效成分，所述细胞囊泡源自于甘露糖修饰的巨噬细胞凋亡所释放。

大量研究表明，巨噬细胞能够有效吞噬肿瘤细胞来源微颗粒；但是，肿瘤细胞来源微颗粒会诱导巨噬细胞M2极化，增加肿瘤生长的风险。M2型肿瘤相关巨噬细胞高表达甘露糖受体。经甘露糖修饰的巨噬细胞微颗粒，表面修饰有甘露糖，可更加高效靶向至M2型肿瘤相关巨噬细胞，将小分子药物更多地递送至M2型肿瘤相关巨噬细胞中，从而增强对M2型肿瘤相关巨噬细胞的逆极化作用，恢复巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤能力，改善肿瘤微环境，提高抗肿瘤效果。

在上述技术方案中，所述巨噬细胞载药微颗粒为磷脂-聚乙二醇-甘露糖(DSPE-PEG-Mannose)与巨噬细胞于培养基中混合培养后分泌获得，或分泌的巨噬细胞微颗粒与磷脂-聚乙二醇-甘露糖孵育获得。