[发明专利]一种去甲金霉素菌株培育及筛选方法

权利要求书

1.一种去甲金霉素菌株培育及筛选方法，其特征在于，所述的去甲金霉素菌株培育及筛选方法包括如下步骤：

第一步，配置培养母液，首先根据使用需要，在培养釜中配置去甲金霉素菌株培养母液，然后在10—30分钟内，将去甲金霉素菌株培养母液匀速升温至25℃—35℃并保温，然后对去甲金霉素菌株培养母液进行30—80分钟超声波乳化作业，并在完成超声波乳化作业后对去甲金霉素菌株培养母液保温静置10—30分钟；

第二步，菌种接种，首先在无菌环境避光条件下，对培养皿和过承载架进行辐照灭活处理，然后通过菌种接种装置将去甲金霉素菌种均与涂布在若干培养皿上表面，让后将各培养皿通过承载架沿竖直方向进行交错固定，且各培养皿上表面均与水平面平行分布，即可完成菌种接种；

第三步，菌种培育，然后在无菌环境避光条件下，将第一步配置的培养母液以3—5次/10小时的频率均匀喷淋至培养皿上端面的将去甲金霉素菌种上，并在25℃—35℃恒温环境下培育2—5天，即可得到将去甲金霉素菌株；且培育过程中，培养皿上端面的培养母液液面高出培养皿上端面的将去甲金霉素菌种上端面1—10毫米，并在每次完成培养母液喷淋后，对各培养皿进行100—160r/min振荡条件下持续匀速振荡10—20分钟，且振荡时培养面上端面与水平面间夹角不大于30°；

第四步，荧光标记，完成第三步作业后，在保持第三步操作条件不变的前提下，继续持续培育1—3天，在进行该步骤培育时，选择各培养皿中的其中一个为标的培养皿，然后向喷淋到标的培养皿的培养母液中混合入生物标记物，并使生物标记物于培养母液一同喷淋到标的培养皿物中；

第五步，筛选，将经过培育后第四步中标的培养皿中的去甲金霉素菌株进行生物标记物浓度检测，并根据生物标记物浓度分布区域对标的培养皿中去甲金霉素菌株进行划分，然后根据标的培养皿中去甲金霉素菌株进行划分分布结构，依次对剩余各培养皿中菌株进行相同分布结构的划分，从而即可完成不同菌株质量划分筛选作业；

第六步，浓缩提纯，根据第五步划分筛选的结果，对除标的培养皿外的其他培养皿中的同区域内的去甲金霉素菌株进行分类收集汇合，然后将不符合标准的区域内的去甲金霉素菌株进行去除并无害化处理，对各区域内的去甲金霉素菌株的浓度机发育状态分别进行浓缩提纯，并使浓缩提纯后各区域内的去甲金霉素菌株的浓度机发育状态保持一致后进行二次汇合即可得到成品。

2.根据权利要求1所述的一种去甲金霉素菌株培育及筛选方法，其特征在于，第一步中，所述培养母液以下质量份数物质构成：葡萄糖1%—3.5%、蛋白胨0.5%—2.3%、EDTA0.1%—0.5%、Ca(ClO)₂0.5%—1.3%、MgSO₄1.1%—2.5%、(NH₄)₂Fe(SO4)₂·6H₂O0.8%—4.3%，余量为生理盐水。

3.根据权利要求1所述的一种去甲金霉素菌株培育及筛选方法，其特征在于，所述第二部中，承载架为轴线与水平面垂直分布的框架结构，所述培养皿包括横断面呈“凵”字型槽状结构的基体及位于基体内与基体同轴分布并呈网板板状结构的托盘，所述基体下端面与承载架通过转台机构相互铰接，所述托盘下端面雨基体底部间间距为0—5毫米，上端面低于培养皿至少3毫米。

4.根据权利要求1所述的一种去甲金霉素菌株培育及筛选方法，其特征在于，所述第四步中的生物标记物为荧光标记物及同位素标记物中的任意一种或两种共用。

5.根据权利要求1所述的一种去甲金霉素菌株培育及筛选方法，其特征在于，所述第四步中的生物标记物在培养母液中的浓度为3%—10%。

6.根据权利要求1所述的一种去甲金霉素菌株培育及筛选方法，其特征在于，所述第六步中，不符合标准的区域内的去甲金霉素菌株进行无害化处理时，采用辐照灭活、生物发酵及高温焚烧中的任意一种或几种同时使用。