[发明专利]一种检测畜禽肉中氯噻啉含量的方法

说明书

本发明涉及一种检测畜禽肉中氯噻啉含量的方法，属于食品检测技术领域。本发明优化了待测样品前处理方法以及液相色谱、质谱条件，解决了现有方法不能测定畜禽肉氯噻啉药物残留的缺陷。本发明方法在10‑400ng/mL范围内线性关系良好，检出限为5.0μg/kg，不同畜禽肉基质中方法回收率为91.41％‑93.51％，相对标准偏差在2.4％‑3.2％之间。本发明具有操作简便，分析速度快，灵敏度高，重现性好的特点。对食品检测领域的畜禽肉中氯噻啉药物残留的定量检测有重要意义。

技术领域

本发明涉及畜禽肉中氯噻啉药物残留的检测方法，属于食品检测技术领域。

背景技术

氯噻啉是一种新烟碱类杀虫剂，是继有机磷、有机氯、氨基甲酸酯和拟除虫菊酯类杀虫剂之后的新型农药。氯噻啉杀虫谱广，对鞘翅目、双翅目和鳞翅目害虫有很好的防治效果，尤其对叶蝉、稻飞虱、蓟马、水稻螟虫有比较高的毒力。且因其价格低廉，使得越来越多的种植人员使用氯噻啉替代原有农药来防治虫害。如果在农药施放环节操作不科学，往往会造成农作物中农药超标。畜禽作为食物链的下游，食入玉米、豆粕、糠、麦麸等农作物的产品或副产品，超量使用的农药会积累到家畜体内，最终危害到人体健康。

在GB 2763-2016《食品安全国家标准食品中农药残留最大限量》中规定氯噻啉最大允许残留量在稻谷中为0.1mg/kg，在小麦中为0.2mg/kg。由于氯噻啉是一种新型农药，所以国内还没有颁布相应的检测标准。

目前，关于氯噻啉检测方法的研究主要有液相色谱法^[1]、气质联用法^[2]、胶体金免疫层析法^[3]、毛细管电泳法^[4]。

液相色谱法：方法以乙酸乙酯-环己烷(V:V＝1:1)为提取溶剂，以超声波法提取水果中的氯噻啉，经固相萃取净化，采用液相色谱法测定。液相色谱紫外检测器检测波长为230nm，流动相为乙腈-水(体积比为60∶40)，流量0.8ml/min，进样量20μl。结果氯噻啉线性范围为1.0×10^-3-1.0×10^-1μg/mL(R²＝0.9998)，平均回收率为97.98％-100.43％，检出限为3.43×10^-2mg/kg，RSD为2.87％。该方法可作为水果中氯噻啉含量的检测。

气质联用法：方法以乙腈超声提取、经Polymer Trap SPE净化，用气相色谱-质谱对氯噻啉进行定性定量检测，农药在0.1-10mg/kg质量浓度范围内呈良好的线性关系，相关系数为R²＝0.9989。在大米中添加0.05、0.2、1.0mg/kg 3个浓度的平均回收率为83.1％-101.4％，相对标准偏差为1.3％-8.9％，最低检测浓度为0.05mg/kg，该方法可用于大米中氯噻啉含量的检测。

胶体金免疫层析法：方法利用生物素-链霉亲和素的高亲和作用，将氯噻啉抗体和生物素化DNA与13nm胶体金双标记，将链霉亲与41nm胶体金标记，制备了氯噻啉胶体金增强免疫层析试纸条。在最优条件下，试纸条可在10min内实现可视化判读，检出限(LOD)为2.5mg/kg，除与吡虫啉有较大交叉反应外，与其它类似化合物无交叉反应。该方法可用于氯噻啉在大米、黄瓜、番茄、梨、甘蓝和苹果样品中的检测。

毛细管电泳法：采用分散液-液微萃取(DLLME)结合胶束电动色谱(MEKC)扫描技术，建立了一种在黄瓜样品中检测氯噻啉杀虫剂的分析方法。在优化条件下，富集系数达到4000至10000。该方法的线性范围为2.7-200mg/kg，相关系数(R²＝0.9968)。检测限为0.8mg/kg。黄瓜样品中氯噻啉杀虫剂浓度水平为10.0mg/kg时的相对标准偏差在6.3％。该方法可用于黄瓜中氯噻啉杀虫剂的分析。