[发明专利]一种利用SILAC标记耻垢分枝杆菌蛋白质的方法及其专用培养基

权利要求书

1.一种用于SILAC标记耻垢分枝杆菌的培养基，其特征在于所述培养基组成为：在不含谷氨酸和天冬氨酸的培养耻垢分枝杆菌的基础培养基中添加重稳定性同位素标记赖氨酸和重稳定性同位素标记精氨酸；其中所述培养基中重稳定性同位素标记赖氨酸在所述培养基中的终浓度为60 mg/L~120 mg/L；重稳定性同位素标记精氨酸在所述培养基中的终浓度为40 mg/L~80 mg/L。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于所述培养基中重稳定性同位素标记赖氨酸在所述培养基中的终浓度为60 mg/L；重稳定性同位素标记精氨酸在所述培养基中的终浓度为40 mg/L。

3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于所述培养基中重稳定性同位素标记赖氨酸在所述培养基中的终浓度为120 mg/L；重稳定性同位素标记精氨酸在所述培养基中的终浓度为80 mg/L。

4.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于使用所述培养基培养5代后耻垢分枝杆菌蛋白质组的标记效率达到90%以上，培养10代后耻垢分枝杆菌蛋白质组的标记效率达到96%以上。

5.根据权利要求1-4任一项所述的培养基，其特征在于所述培养基包括无机盐、组氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、丝氨酸、重稳定性同位素标记赖氨酸、重稳定性同位素标记精氨酸、苏氨酸、酪氨酸、蛋氨酸、腺嘌呤硫酸盐、尿嘧啶和葡萄糖；

所述无机盐为硫酸铵、柠檬酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、柠檬酸铁铵、硫酸镁、氯化钙、硫酸锌和硫酸铜；所述组氨酸盐酸盐为L-组氨酸盐酸盐；所述异亮氨酸为L-异亮氨酸；所述缬氨酸为L-缬氨酸；所述亮氨酸为L-亮氨酸；所述苯丙氨酸为L-苯丙氨酸；所述色氨酸为L-色氨酸；所述丝氨酸为L-丝氨酸；所述重稳定性同位素标记赖氨酸为重稳定性同位素标记L-赖氨酸；所述重稳定性同位素标记精氨酸为重稳定性同位素标记L-精氨酸；所述苏氨酸为L-苏氨酸；所述酪氨酸为L-酪氨酸；所述蛋氨酸为L-蛋氨酸。

6.根据权利要求1-5任一项所述的培养基，其特征在于所述培养基中：

所述硫酸铵、所述柠檬酸钠、所述磷酸氢二钠、所述磷酸二氢钾、所述柠檬酸铁铵、所述硫酸镁、所述氯化钙、所述硫酸锌、所述硫酸铜、所述葡萄糖、所述L-组氨酸盐酸盐、所述L-异亮氨酸、所述L-缬氨酸、所述L-亮氨酸、所述L-苯丙氨酸、所述L-色氨酸、所述L-丝氨酸、所述重稳定性同位素标记的L-赖氨酸、所述重稳定性同位素标记的L-精氨酸、所述L-苏氨酸、所述L-酪氨酸、所述L-蛋氨酸、所述腺嘌呤硫酸盐和所述尿嘧啶的质量比为500：100 ：2500：1000：40：50：0.5：1：1：2000：20：30：150：30：50：20：400：120：80：200：30：20：20：20。