[发明专利]一种胚胎的玻璃化冷冻和解冻方法

权利要求书

1.一种胚胎的玻璃化冷冻法，是将冷冻液和解冻液分段装入细管 内，每段液体之间都用一段空气隔开，其中在一段冷冻液中置 入了经过预处理液处理过的胚胎，然后将细管封口、投入液氮， 其特征在于，装入细管内的冷冻液和解冻液各有两段，其装管 顺序为：首先装入一段解冻液(6)，然后装入一段空气(3)， 接着装入一段冷冻液(5)，再装入一段空气(3)，然后再装入 一段冷冻液(4)，并在该段冷冻液中置入胚胎，接着再装入一 段空气(3)，最后在管端装入一段解冻液(2)并封闭管口；装 入细管内的冷冻液与解冻液的体积比值小于或等于1∶5，或混 合后混合液中抗冻保护剂的浓度在2.0Mol/L以内。

2.根据权利要求1所述的胚胎的玻璃化冷冻法，其特征在于，装 入细管中的第二段解冻液(2)的长度为0.4～1.5cm。

3.根据权利要求1或2所述的胚胎的玻璃化冷冻法，其特征在于， 装管时，按顺序吸入7.5cm长的解冻液-1cm长的空气-0.4cm 长的冷冻液-0.5cm长的空气-0.6cm长的冷冻液-1cm长的空 气，将胚胎移入0.6cm长的冷冻液节段后，吸入0.5cm长的解 冻液后封口，投入液氮冷冻。

4.根据权利要求1所述的胚胎的玻璃化冷冻法，其特征在于，装 管时，按顺序吸入6cm长的解冻液-1cm长的空气-0.4cm长 的冷冻液-0.5cm长的空气-0.8cm长的冷冻液-1cm长的空 气，将胚胎移入0.8cm长的冷冻液节段后，吸入1.8cm长的解 冻液后封口，投入液氮冷冻。

5.根据权利要求1或2所述的胚胎的玻璃化冷冻法，其特征在于， 装管时，按顺序吸入8.2cm长的解冻液-0.5cm长的空气- 0.3cm长的冷冻液-0.5cm长的空气-0.5cm长的冷冻液-1cm 长的空气，将胚胎移入0.5cm长的冷冻液节段后，吸入少许解 冻液后封口，投入液氮冷冻。

6.一种采用权利要求1所述的胚胎的玻璃化冷冻法冷冻的胚胎的简易解冻法，其特征在于，在室温下，将冷冻保存胚胎的细管 由液氮中取出后，空气浴4～6s，然后浸入20～25℃水浴中， 待内容物融解后，取出细管，来回颠倒甩动细管，使细管内的 液体混合均匀后，用于胚胎移植。

7.根据权利要求6所述的胚胎的简易解冻法，其特征在于，所述 的室温为20～25℃。