[发明专利]检测器联用法测定瑞格列奈二甲双胍片中瑞格列奈的杂质

说明书

本发明属于药物分析领域，即通过一种高效液相色谱法串联两种检测器技术分离测定瑞格列奈二甲双胍片中瑞格列奈的5种杂质。色谱方法为：以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸二氢钾缓冲溶液(质量分数为0.1％～1％，pH值为2.0～8.0)‑乙腈为流动相；检测器为二极管阵列及荧光检测器串联，检测波长分别为210～310nm及激发波长200～300m、发射波长300～400nm；流速为0.5～2.0ml/min，进样体积为10～100μl，样品溶液浓度为0.01～1.0mg/ml。利用本发明方法可以准确定量计算瑞格列奈二甲双胍片中瑞格列奈的5种杂质，保证了瑞格列奈二甲双胍片的质量可控性。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及通过高效液相色谱法分离测定复方瑞格列奈二甲双胍片中瑞格列奈杂质的方法。

背景技术

瑞格列奈二甲双胍片为瑞格列奈及盐酸二甲双胍复合制剂，由诺和诺德公司(Novo Nordisk)研制开发，于2008年6月23日获FDA批准，在美国上市，商品名为目前未在国内上市。该产品用于治疗饮食控制及运动锻炼不能有效控制高血糖的2型糖尿病 (非胰岛素依赖性)，其中瑞格列奈成分是促胰岛素分泌剂，是甲基甲胺苯甲酸(CMBA)衍生物，其通过与胰岛β细胞膜上的特异性受体结合，促进细胞膜的ATP依赖性K⁺通道关闭，抑制K⁺从β细胞外流，使细胞膜去极化，从而开放电压依赖Ca²⁺通道，使细胞外Ca²⁺进入细胞内，促进储存的胰岛素分泌。

瑞格列奈化学名为S(+)-2-乙氧基-4-{2-[(3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)丁基)氨基]-2-氧代乙基}苯甲酸，分子式为C₂₇H₁₆N₂O₄，化学结构式r如下。

瑞格列奈化学结构式

瑞格列奈在合成过程中的起始原料、中间体、终产物类似物及降解产物等均可能成为杂质，该产品为糖尿病患者长期服用常规药物，若产品中的杂质含量较高，容易对患者产生长期毒性，因此需对产品中的杂质进行严格控制。

瑞格列奈原料已被收载于世界主要现行国家药典标准中(欧洲药典、美国药典及中国药典)，所控制的该物质杂质的结构和化学式信息见表1。

表1瑞格列奈的杂质结构和化学式

杂质1与杂质3为瑞格列奈酰胺键断裂后的降解产物，杂质2、杂质4为合成副产物，杂质5为原料带入杂质，此5种杂质均会影响该物质制备成制剂后的产品质量，应进行全面控制。各国药典对瑞格列奈杂质控制情况如下：中国药典2015年版无已知杂质控制，欧洲药典9.2版标准中对5种已知杂质进行控制(其中杂质E为光学异构体，有单独的测定方法，未控制美国药典标准中的杂质C)，美国药典42版控制3种已知杂质(其中有2种已知杂质与欧洲药典相同)。因此，各国药典均不能全面控制表1内5种杂质。

另外，复方瑞格列奈二甲双胍片目前没有可供参考的药典标准方法，且由于复方制剂中含有较大量的盐酸二甲双胍成分(盐酸二甲双胍与瑞格列奈的质量比为500:1)，在二极管阵列检测器条件下对瑞格列奈及其杂质的的检测存在严重干扰，各药典中瑞格列奈标准方法(均采用二极管阵列检测器)即现有技术并不适用于该复方片中的瑞格列奈的杂质控制。