[发明专利]姜黄素的高效液相检测方法

权利要求书

1.一种姜黄素的高效液相检测方法，其特征在于，采用色谱条件如下：

色谱柱采用反相C18色谱柱；

检测器采用PDA检测器；

流动相包括流动相A和流动相B；流动相A是甲酸-醋酸铵的水溶液和乙腈的混合溶液，水溶液中甲酸体积浓度为0.01～0.03％，水溶液中醋酸铵浓度为0.5～1.5mM，水溶液与乙腈的体积比为100～95：0～5；流动相B是甲酸-醋酸铵的乙腈溶液和水的混合溶液，乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.01～0.03％，乙腈溶液中醋酸铵浓度为0.5～1.5mM，乙腈溶液与水的体积比为100～95：0～5；

采用梯度洗脱，梯度洗脱程序按以下程序进行：流动相A+流动相B＝100％，0～0.01min，流动相B保持体积百分比为50％；0.01～2.10min，流动相B体积百分比由50％递增至60％；2.10～2.11min，流动相B体积百分数由60％递减至50％；2.11～3.00min，流动相B保持体积百分数为50％。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相A是甲酸-醋酸铵的水溶液和乙腈的体积分数为95：5的混合溶液，流动相B是甲酸-醋酸铵的乙腈溶液和水的体积分数为95：5的混合溶液。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述流动相A中，水溶液中甲酸体积浓度为0.025％；所述流动相B中，乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.025％。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述流动相A中，水溶液中醋酸铵浓度为1mM；所述流动相B中，乙腈溶液中醋酸铵浓度为1mM。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱柱长为100mm。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，流速为1.0～2.0ml/min。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，检测波长为250-270nm。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，柱温控制在35～40℃。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，进样量为2～8μl。

10.一种测定姜黄素含量的高效液相方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对照品溶液及供试品溶液的制备：精密称取适量姜黄素对照品，用二甲基亚砜溶解并定容成具有一定浓度梯度的多个对照品溶液；精密称取适量姜黄素供试品，用甲基亚砜溶解并定容得到供试品溶液；

(2)色谱条件：

色谱柱采用反相C18色谱柱；

检测器采用PDA检测器；

流动相包括流动相A和流动相B；流动相A是甲酸-醋酸铵的水溶液和乙腈的混合溶液，水溶液中甲酸体积浓度为0.025％，水溶液中醋酸铵浓度为1mM，水溶液与乙腈的体积比为95：5；流动相B是甲酸-醋酸铵的乙腈溶液和水的混合溶液，乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.025％，乙腈溶液中醋酸铵浓度为1mM，乙腈溶液与水的体积比为95：5；

采用梯度洗脱，梯度洗脱程序按以下程序进行：0～0.01min，流动相B保持体积百分比为50％；0.01～2.10min，流动相B体积百分比由50％递增至60％；2.10～2.11min，流动相B体积百分数由60％递减至50％；2.11～3.00min，流动相B保持体积百分数为50％；

(3)测定方法：

将所述多个对照品溶液以及供试品溶液按所述(2)色谱条件依次进样，记录色谱图，根据多个对照品溶液的图谱数据和浓度数据制备线性相关工作曲线，代入供试样品的图谱数据计算并得出供试品溶液浓度，完成了姜黄素含量的测定。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液的浓度依次为6.25、12.5、25、50、100、200μg/ml。

12.如权利要求10所述的方法，其特征在于，色谱条件中流速为1.4ml/min，检测波长为254nm，柱温为40℃，进样量为3～5μl。