[发明专利]姜黄素的高效液相检测方法

说明书

本发明公开一种姜黄素的高效液相检测方法，采用反相C18色谱柱、PDA检测器，流动相A是甲酸‑醋酸铵的水溶液和乙腈的混合溶液，流动相B是甲酸‑醋酸铵的乙腈溶液和水的混合溶液，采用梯度洗脱。本方法进样3～5ul，能够有效检出姜黄素及其有关物质，并且分离度R能达1.5以上，分离效果好，HPLC谱基线平稳，不发生漂移；本方法检测时间短，只需3min即可完成高效液相检测过程，大大提高了检测效率，适合高通量筛选；能节省溶剂，降低成本，操作安全简易，处理方便快捷；用于姜黄素的含量测定，具有良好的线性关系，重现性高，精确度和准确度高，在原料药、制剂质量研究以及相关药动学定量研究等方面具有重要研究价值。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种姜黄素的高效液相检测方法。

背景技术

姜黄素(Itraconazole)最早是在1870年从姜黄中首次分离出来一种低相对分子质量多酚类化合物，1910年阐明了其双阿魏酰甲烷的化学结构，随后有关其生理，药理作用的研究取得了明显的进展。随着对姜黄素研究的日益深入，已发现其具有抗炎、抗氧化、调脂、抗病毒、抗感染、抗肿瘤、抗凝、抗肝纤维化、抗动脉粥样硬化等广泛的药理活性，且毒性低、不良反应小。吸引研究人员的不仅是姜黄素作为一种非甾体类抗炎药物，而因为其所具有的化学预防特性，姜黄素对疾病具有广泛的预防特性。鉴于现代医学研究发现人体众多疾病的发生与自由基的形成、炎症反应的参与有关，姜黄素抗氧化活性与抗炎作用已引起国内外学者的广泛关注，开发姜黄素的高效液相检测方法对于姜黄素的药用研究具有重要的意义。

关于姜黄素的含量测定，现有技术已有报道：雷云霞，孙立立，杨树斌，王娇，中国药师.2007.10，其检测方法是：采用Agilent 1100Series高效液相色谱仪，LichrospherODS C18(150mm*4.6mm,5μm)色谱柱，流动相为乙腈-水(5％冰醋酸)(45:55)，流速：1ml/min，进样量20ul，在420nm波长处检测；该方法主要是对郁金饮片中姜黄素的含量测定。发明人按该方法对姜黄素含量进行测试，发现预处理过程复杂，进样体积较大，化合物损耗大，且检测需要15min以上，耗时长。

本发明针对现有技术中的检测方法进行了改进与优化，与现有技术中的方法相比，本发明的检测方法不仅分离效果好，精密度和准确度高，而且操作安全简易，处理方便快捷，适合高通量筛选及精准定量。该方法对姜黄素的原料、制剂质量研究以及相关药动学定量研究等方面均具有重要研究价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种检测时间短、分离效果好、精确度和准确度更高的姜黄素的高效液相检测方法。

为解决上述技术问题，本发明提供的姜黄素的高效液相检测方法，其中，

色谱柱采用反相C18色谱柱；

检测器采用PDA检测器；

流动相包括流动相A和流动相B；流动相A是甲酸-醋酸铵的水溶液和乙腈的混合溶液，水溶液中甲酸体积浓度为0.01～0.03％，水溶液中醋酸铵浓度为0.5～1.5mM，水溶液与乙腈的体积比为100～95：0～5；流动相B是甲酸-醋酸铵的乙腈溶液和水的混合溶液，乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.01～0.03％，乙腈溶液中醋酸铵浓度为0.5～1.5mM，乙腈溶液与水的体积比为100～95：0～5；

采用梯度洗脱，梯度洗脱程序按以下程序进行：流动相A+流动相B＝100％，0～0.01min，流动相B保持体积百分比为50％；0.01～2.10min，流动相B体积百分比由50％递增至60％；2.10～2.11min，流动相B体积百分数由60％递减至50％；2.11～3.00min，流动相B保持体积百分数为50％。

在一个优选的实施例中，流动相A是甲酸-醋酸铵的水溶液和乙腈的体积分数为95：5的混合溶液，流动相B是甲酸-醋酸铵的乙腈溶液和水的体积分数为95：5的混合溶液。