[发明专利]一种结合复合酶解的两步式蛹虫草酵素的发酵制备方法

权利要求书

1.一种结合复合酶解的两步式蛹虫草酵素的发酵制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）蛹虫草粉和蛹虫草浆的制备：将蛹虫草干样去杂后，利用电机转速为34000r/min的高速粉碎机粉碎，并过100目筛，得蛹虫草粉；蛹虫草粉与水按照1:10~15的质量比例互溶后，用转速为3000~3600r/min的高速匀浆机间歇搅拌1~2min混匀，每次持续时间不超过10s，得到蛹虫草浆；

（2）蛹虫草发酵基质的制备：以蛹虫草发酵基质的总质量计，其中30~40%为步骤（1）所得的蛹虫草浆，10~20%为作为发酵碳源的红糖，其余为蒸馏水；对配制好的蛹虫草发酵基质进行巴氏杀菌处理；

（3）复合酶解协同乳酸菌发酵：将杀完菌的蛹虫草发酵基质冷却到40~45℃，用柠檬酸溶液调pH至4.80~5.00，以蛹虫草发酵基质的总质量计，加入0.4~0.6%的纤维素酶和0.4~0.6%的果胶酶，并在发酵基质上接种0.1~0.2%的乳酸菌，使复合酶解和乳酸菌同时在40~45℃下酶解并发酵36~48h，然后在85~90℃的水浴锅中灭酶5~10min，获得发酵液；

（4）果酒酵母菌发酵：将步骤（3）所得的发酵液降温至28~32℃，然后接种质量百分比为0.10~0.15%的果酒酵母菌，在26~30℃下恒温发酵6~18h；

（5）离心：取经过乳酸菌、果酒酵母菌两步发酵的蛹虫草发酵液进行离心4200r/min，10min，离心后过滤得澄清液；

（6）调配：在步骤（5）离心所得的澄清液中加入稳定剂；

（7）杀菌灌装：调配完的发酵液进行95~100℃，5~10min的杀菌；冷却到85~90℃，趁热灌入已预先灭菌的玻璃瓶内，即得到蛹虫草酵素产品。

2.根据权利要求1所述的一种结合复合酶解的两步式蛹虫草酵素的发酵制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中的巴氏杀菌温度为80~90℃，时间为10~20min。

3.根据权利要求1或2所述的一种结合复合酶解的两步式蛹虫草酵素的发酵制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中，柠檬酸溶液浓度以质量百分比计为10%；所述纤维素酶的酶活为5万U/g，果胶酶的酶活为10万U/g，适宜的酶解温度为40~50℃。

4.根据权利要求1或2所述的一种结合复合酶解的两步式蛹虫草酵素的发酵制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中，所述乳酸菌的接种过程在超净台中完成；所述乳酸菌为益生菌发酵菌粉，其中含有植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、乳双歧杆菌、干酪乳杆菌和长双歧杆菌，菌种量达80亿CFU/g，适宜生长温度为37~45℃。

5.根据权利要求3所述的一种结合复合酶解的两步式蛹虫草酵素的发酵制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中，所述乳酸菌的接种过程在超净台中完成；所述乳酸菌为益生菌发酵菌粉，其中含有植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、乳双歧杆菌、干酪乳杆菌和长双歧杆菌，菌种量达80亿CFU/g，适宜生长温度为37~45℃。

6.根据权利要求1、2或5所述的一种结合复合酶解的两步式蛹虫草酵素的发酵制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中，果酒酵母菌的接种过程在超净台中完成；所述果酒酵母菌为葡萄酒果酒专用酵母粉，使用前需先用35~40℃温水进行活化，再将其接种至温度为26~30℃的发酵液中。

7.根据权利要求3所述的一种结合复合酶解的两步式蛹虫草酵素的发酵制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中，果酒酵母菌的接种过程在超净台中完成；所述果酒酵母菌为葡萄酒果酒专用酵母粉，使用前需先用35~40℃温水进行活化，再将其接种至温度为26~30℃的发酵液中。

8.根据权利要求4所述的一种结合复合酶解的两步式蛹虫草酵素的发酵制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中，果酒酵母菌的接种过程在超净台中完成；所述果酒酵母菌为葡萄酒果酒专用酵母粉，使用前需先用35~40℃温水进行活化，再将其接种至温度为26~30℃的发酵液中。