[发明专利]一株生物催化合成(R)-1,3-丁二醇的贝莱斯芽孢杆菌菌株及其应用

权利要求书

1.一株生物催化合成(R)-1,3-丁二醇的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)菌株SWGC31011，保藏编号为CGMCC No.13354。

2.一种权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌菌株SWGC31011的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将贝莱斯芽孢杆菌菌株SWGC31011接种至种子培养基中，在28～30℃下培养8～10h，得到贝莱斯芽孢杆菌菌株SWGC31011菌种；

2)将步骤1)中所述贝莱斯芽孢杆菌菌株SWGC31011菌种接种至发酵培养基，在28～30℃、150～300rpm下培养24～36h，得到的发酵液固液分离，收集含羰基还原酶的贝莱斯芽孢杆菌菌株SWGC31011菌体。

3.根据权利要求2所述培养方法，其特征在于，所述种子培养基为LB培养基；所述发酵培养基包括以下浓度的组分：葡萄糖10～45g/L、酵母膏10～50g/L、MgSO₄0.2～1.5g/L、(NH₄)₂HPO₄0.5～3.5g/L和KH₂PO₄0.5～3.5g/L，溶剂为水，pH值为5.5～8.5。

4.根据权利要求2所述培养方法，其特征在于，所述步骤1)或步骤2)中接种的接种量为0.1％～10％。

5.根据权利要求2所述培养方法，其特征在于，所述收集含羰基还原酶的贝莱斯芽孢杆菌菌株SWGC31011菌体的方法是将固液分离后得到的固相经生理盐水洗涤后，得到菌体；

所述固液分离为离心；所述离心的转速为7000～9000rpm，所述离心的时间为10～20min。

6.权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌菌株SWGC31011在合成(R)-1,3-丁二醇中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述合成(R)-1,3-丁二醇的方法包括以下步骤：

以4-羟基-2-丁酮为底物，以权利要求2～5任意一项所述培养方法中得到的含羰基还原酶的贝莱斯芽孢杆菌菌株SWGC31011菌体为催化剂，在20～50℃条件下，pH值6.0～9.0的缓冲液中进行不对称加氢还原反应8～72h，反应结束后反应液经分离纯化得到手性化合物(R)-1,3-丁二醇。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述缓冲液中底物的初始浓度为5～45g/L。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，以湿重计，所述缓冲液中含羰基还原酶的贝莱斯芽孢杆菌菌株SWGC31011菌体的浓度为10～55g/L。

10.根据权利要求7～9任意一项所述的应用，其特征在于，所述缓冲液包括pH值6.0～7.0的柠檬酸缓冲液或pH值6.5～7.5的磷酸盐缓冲液；

所述缓冲液还包括10～120g/L的辅助底物；

所述辅助底物为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、木糖、果糖或甘油。