[发明专利]一种催化合成米格列醇中间体的转化菌株及方法有效
申请号: | 201910160667.0 | 申请日: | 2019-03-04 |
公开(公告)号: | CN110016455B | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 郑裕国;柯霞;余盼红;胡忠策;吴洋;陈亮 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学;浙江医药股份有限公司新昌制药厂 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P19/26;C12R1/01 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 沈金龙 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 催化 合成 米格 中间体 转化 菌株 方法 | ||
1.一种使用转化菌株催化合成米格列醇中间体的方法,所述转化菌株命名为氧化葡糖杆菌(
所述的方法,包括以下步骤:
(1)将所述转化菌株发酵产酶,并收集发酵后的菌体获得静息细胞;
(2)使用步骤(1)制备的静息细胞催化底物N-羟乙基葡萄糖胺获得产物米格列醇中间体:6-脱氧-6氨基(N-羟乙基)-α-L-呋喃山梨糖,
步骤(1)中静息细胞的制备方法包括以下步骤:将所述转化菌株接种到培养基中进行发酵培养,然后收集菌体获得所述静息细胞,其中,所述培养基包括:D-山梨醇50 g/L,酵母浸出粉25 g/L,KH2PO4 5 g/L,K2HPO4 5 g/L,溶剂为水,
所述培养基还包括谷氨酸钠、异亮氨酸、丝氨酸和精氨酸,谷氨酸钠2g/L,异亮氨酸、丝氨酸和精氨酸各1 g/L。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中催化反应使用体系组成为:底物N-羟乙基葡萄糖胺60~120 g/L,步骤(1)制备的静息细胞以湿菌体重量计40~80 g/L,其余为水。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(2)中催化反应使用体系组成为:底物N-羟乙基葡萄糖胺100 g/L,七水硫酸镁5 g/L,步骤(1)制备的静息细胞以湿菌体重量计60g/L,其余为水,调节pH为5.0。
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