[发明专利]一种基因修饰的树突状细胞疫苗的制备及应用

权利要求书

1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白具有式I所示的结构：

Z1-L1-Z2-L2-Z3 （I）

其中，

Z1为无或信号肽元件；

L1为无或连接肽；

Z2为TRAG-3蛋白；

L2为无或连接肽；

Z3为LAMP-1蛋白的跨膜区和胞内区；

各“-”独立地为连接肽或肽键或非肽键；

其中，所述TRAG-3蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示，所述LAMP-1蛋白的跨膜区和胞内区如SEQ ID NO.:6所示。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述Z1为含有SEQ ID NO.:4所示序列的多肽。

3.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述的连接肽序列长度为1-20个氨基酸。

4.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述连接肽为具有n个重复的如SEQ IDNO.: 7(Gly-Gly- Gly-Gly-Ser)所示的序列，其中n为1-3。

5.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述连接肽的氨基酸序列如SEQ IDNO.:7所示。

6.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.:8所示。

7.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码权利要求1所述的融合蛋白。

8.如权利要求7所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸具有式II所示的结构：

A1-S1-A2-S2-A3 （II）

其中，

A1为无或信号肽元件的编码序列；

S1为无或连接序列；

A2为TRAG-3蛋白的编码序列；

S2为无或连接序列；

A3为LAMP-1蛋白的跨膜区和胞内区的编码序列；

各“-”独立地为键或核苷酸连接序列。

9.如权利要求7所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸选自下组：

(a)编码如SEQ ID NO.:8所示多肽的多核苷酸；

(b)序列如SEQ ID NO.:9所示的多核苷酸；

(c)核苷酸序列与SEQ ID NO.:9所示序列的同源性≥95%，且编码SEQ ID NO.:8所示多肽的多核苷酸；

(d)与(a)-(c)任一所述的多核苷酸互补的多核苷酸。

10.一种载体，其特征在于，包括权利要求7所述的多核苷酸。

11.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求10所述的载体或基因组中整合有权利要求7所述的多核苷酸。

12.如权利要求11所述的宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞包括活化的树突状细胞。

13.一种产生权利要求1所述的融合蛋白的方法，其特征在于，包括步骤：

在适合表达所述融合蛋白的条件下，培养本权利要求11所述的宿主细胞，从而表达出权利要求1所述的融合蛋白；和

分离所述的融合蛋白。

14.一种权利要求1所述融合蛋白的用途，其特征在于，用于制备预防和/或治疗肿瘤的疫苗药物。

15.如权利要求14所述的用途，其特征在于，所述肿瘤包括TRAG-3阳性肿瘤。

16.一种树突状细胞，其特征在于，所述树突状细胞为用权利要求1所述的融合蛋白活化的树突状细胞。