[发明专利]一种基于儿茶素与多酚氧化酶结合增强鱼肌原纤维蛋白凝胶特性的方法有效
| 申请号： | 201910162704.1 | 申请日： | 2019-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN109924339B | 公开（公告）日： | 2022-08-26 |
| 发明（设计）人： | 启航;隋悦;于文溪;孙一含;蒋迪;贺宝玉;董秀萍;姜鹏飞 | 申请（专利权）人： | 大连工业大学 |
| 主分类号： | A23J1/04 | 分类号： | A23J1/04;A23J3/04;A23J3/34 |
| 代理公司： | 大连格智知识产权代理有限公司 21238 | 代理人： | 刘琦 |
| 地址： | 116034 辽宁省大*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 儿茶素 氧化酶 结合 增强 鱼肌原 纤维蛋白 凝胶 特性 方法 | ||
1.一种基于儿茶素与多酚氧化酶结合增强鱼肌原纤维蛋白凝胶特性的方法，其特征在于，包括步骤：
S1、提取肌原纤维蛋白：取鱼肉，制备鱼肌原纤维蛋白溶液；
S2、混合：取步骤S1所述鱼肌原纤维蛋白溶液，添加儿茶素混合，得混合物；其中，每8～16g、浓度为35～100mg/ml的鱼肌原纤维蛋白溶液添加30μmol～220μmol的儿茶素；
S3、加酶：向步骤S2所述混合物中加入多酚氧化酶，30～50℃静置1～5h，得混合物2；以步骤S2所述鱼肌原纤维蛋白溶液的添加量为基准，每8～16g、浓度为35～100mg/ml的鱼肌原纤维蛋白溶液添加多酚氧化酶1000U～10000U；
S4、冷藏静置：将步骤S3所述混合物2冷藏静置，得半成品；
S5、热处理：将步骤S4所述半成品置于40～100℃加热5～30min，得凝胶；
S6、冷却平衡：将步骤S5所述凝胶冷却平衡，得鱼肌原纤维蛋白胶制品；具体为：0℃静置10～50min，然后置于20～30℃静置1～4h。
2.根据权利要求1所述基于儿茶素与多酚氧化酶结合增强鱼肌原纤维蛋白凝胶特性的方法，其特征在于，步骤S1所述鱼肉为罗非鱼肉。
3.根据权利要求1所述基于儿茶素与多酚氧化酶结合增强鱼肌原纤维蛋白凝胶特性的方法，其特征在于，步骤S1所述制备鱼肌原纤维蛋白溶液，包括步骤：
S11：取鱼肉，按照料液比1:3g/ml加入50mM、pH6.0的磷酸盐缓冲液，8000rpm匀浆2min，8000g离心15min，取沉淀1；
S12：将步骤S11所述沉淀1按料液比1:3g/ml加入50mM、pH6.0的磷酸盐缓冲液，8000rpm匀浆2min，8000g离心15min，取沉淀2；
S13：将步骤S12所述沉淀2按料液比1:3g/ml加入50mM、pH6.0的磷酸盐缓冲液，8000rpm匀浆2min，8000g条件下离心15min，取沉淀3；
S14：将步骤S13所述沉淀3按料液比1:3g/ml加入0.1M NaCl，8000rpm匀浆1min，8000g离心15min，取沉淀4；
S15：将步骤S14所述沉淀4按料液比1:3g/ml加入0.1M NaCl，8000rpm匀浆1min，8000g离心15min，取沉淀5；
S16：将步骤S15所述沉淀5按料液比1:3g/ml加入0.1M NaCl，过80目两层纱布，所得液体在8000g离心15min，所得沉淀即为肌原纤维蛋白；用25mM磷酸盐缓冲液将肌原纤维蛋白稀释成鱼肌原纤维蛋白溶液。
4.根据权利要求3所述基于儿茶素与多酚氧化酶结合增强鱼肌原纤维蛋白凝胶特性的方法，其特征在于，步骤S16所述25mM磷酸盐缓冲液中含有0.6mol NaCl。
5.根据权利要求1所述基于儿茶素与多酚氧化酶结合增强鱼肌原纤维蛋白凝胶特性的方法，其特征在于，步骤S2所述儿茶素以儿茶素溶液的形式添加，所述儿茶素溶液浓度为80～220μmol/mL。
6.根据权利要求1所述基于儿茶素与多酚氧化酶结合增强鱼肌原纤维蛋白凝胶特性的方法，其特征在于，步骤S4所述冷藏静置具体为：4℃，静置12～20h。
7.根据权利要求1所述基于儿茶素与多酚氧化酶结合增强鱼肌原纤维蛋白凝胶特性的方法，其特征在于，包括步骤：
S1、提取肌原纤维蛋白：取罗非鱼肉，制备成浓度为100mg/ml的罗非鱼肌原纤维蛋白溶液；
S2、混合：取16g步骤S1所述罗非鱼肌原纤维蛋白溶液，添加1ml浓度为220μmol/mL的儿茶素溶液后混合，得混合物；
S3、加酶：向步骤S2所述混合物中加入10000U多酚氧化酶，50℃静置5h，得混合物2；
S4、冷藏静置：将步骤S3所述混合物2，4℃静置20h，得半成品；
S5、热处理：将步骤S4所述半成品置于100℃加热5min，得凝胶；
S6、冷却平衡：将步骤S5所述凝胶0℃冷却10min，然后置于20℃放置1h，得罗非鱼肌原纤维蛋白胶制品；
其中步骤S1所述罗非鱼肌原纤维蛋白溶液的制备方法，包括步骤：
S11：取罗非鱼肉按照料液比1:3g/ml加入50mM、pH6.0的磷酸盐缓冲液，8000rpm匀浆2min，8000g离心15min，取沉淀1；
S12：将步骤S11所述沉淀1按料液比1:3g/ml加入50mM、pH6.0的磷酸盐缓冲液，8000rpm匀浆2min，8000g离心15min，取沉淀2；
S13：将步骤S12所述沉淀2按料液比1:3g/ml加入50mM、pH6.0的磷酸盐缓冲液，8000rpm匀浆2min，8000g离心15min，取沉淀3；
S14：将步骤S13所述沉淀3按料液比1:3g/ml加入0.1M NaCl，8000rpm匀浆1min，8000g离心15min，取沉淀4；
S15：将步骤S14所述沉淀4按料液比1:3g/ml加入0.1M NaCl，8000rpm匀浆1min，8000g离心15min，取沉淀5；
S16：将步骤S15所述沉淀5按照料液比1:3g/ml加入0.1M NaCl，过80目两层纱布，所得液体在8000g离心15min，所得沉淀即为罗非鱼肌原纤维蛋白；用25mM磷酸盐缓冲液将所述罗非鱼肌原纤维蛋白稀释成浓度为100mg/ml的罗非鱼肌原纤维蛋白溶液；其中，所述25mM磷酸盐缓冲液中含有0.6molNaCl。
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