[发明专利]一种放线菌抗菌次生代谢产物的制备方法在审
申请号: | 201910163399.8 | 申请日: | 2019-03-05 |
公开(公告)号: | CN110656131A | 公开(公告)日: | 2020-01-07 |
发明(设计)人: | 张新军;曹舰艇 | 申请(专利权)人: | 西藏农牧学院 |
主分类号: | C12P1/04 | 分类号: | C12P1/04;C12R1/01 |
代理公司: | 11569 北京高沃律师事务所 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 西藏自治区林芝*** | 国省代码: | 西藏;54 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 放线菌 次生代谢产物 抗菌 固体培养基 菌体发酵液 液体培养基 发酵产物 制备 接种 微生物技术领域 乙酸乙酯提取物 乙酸乙酯浸提 葡萄糖 酵母提取物 麦芽提取物 发酵过程 固液分离 液态发酵 乙酸乙酯 蛋白胨 酵母膏 支持物 去除 代谢 发酵 氧气 能耗 积累 | ||
1.一种放线菌抗菌次生代谢产物的制备方法,包括以下步骤:
(1)将产抗菌次生代谢产物的放线菌接种于液体培养基中培养65~80h,得到菌体发酵液;
按重量份计,所述液体培养基的原料包括酵母提取物2~8份、葡萄糖2~8份和麦芽提取物8~20份和水800~1000份;
(2)将所述菌体发酵液接种于固体培养基进行发酵,得到活性发酵产物;
按重量份计,所述固体培养基的原料包括介质支持物70~150份、酵母膏1~6份和蛋白胨7~20份和水80~120份;
所述介质支持物选自大米、高粱或小麦中的一种或多种;
(3)以乙酸乙酯浸提所述活性发酵产物,固液分离得到乙酸乙酯提取物,去除乙酸乙酯,得到放线菌抗菌次生代谢产物。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的培养时还伴随搅拌。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的液体培养基pH值为7.0~7.4。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中菌体发酵液的接种量为0.12~0.5ml/kg。
5.根据权利要求1或4所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中的固体培养基制备方法包括以下步骤:
S1、将酵母膏、蛋白胨和水混合,调节pH值为7.5,得到预混合液;
S2、将预混合液与介质支持物混合,静置6~10h,得到混合物;
S3、将混合物灭菌,振荡至介质支持物的任意两个颗粒之间不粘连,得到固体培养基。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,乙酸乙酯的浸提次数为2~4次。
7.根据权利要求1或6所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述乙酸乙酯浸提时,乙酸乙酯与固态发酵物的体积比为1:1。
8.根据权利要求1或6所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述浸提的时间优选为30~60min。
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