[发明专利]一株产γ-氨基丁酸乳酸菌菌株及其筛选方法和富含γ-氨基丁酸仙草酸奶的制备方法在审
| 申请号： | 201910169739.8 | 申请日： | 2019-03-07 |
| 公开（公告）号： | CN109897799A | 公开（公告）日： | 2019-06-18 |
| 发明（设计）人： | 潘道东;郭宇星;王鹏宇;李桦 | 申请（专利权）人： | 南京师范大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;A23C9/13;A23C9/127;A01C1/00;C12R1/24 |
| 代理公司： | 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 | 代理人： | 何仲 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市鼓*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 氨基丁酸 发酵剂 产γ -氨基丁酸乳酸菌 富含 保藏 仙草 短乳杆菌 酸奶 制备 胡萝卜素 乳酸菌 中国微生物菌种 草酸 筛选 乳酸菌菌株 膳食纤维素 嗜热链球菌 微生物中心 保温发酵 活性因子 均质灭菌 溶液混合 酸奶制备 脱脂乳粉 豆芽 酶解液 熊果酸 蔗糖 奶制品 多肽 后熟 黄酮 活化 菌株 盐藻 维生素 冷却 分类 管理 | ||
1.一株产γ-氨基丁酸的乳酸菌，其特征在于：该乳酸菌分类命名为短乳杆菌（
2.一种权利要求1所述的产γ-氨基丁酸的乳酸菌的筛选方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）乳酸菌的初步筛选及分离纯化
挑选新鲜牛乳为样品稀释后，涂布于含有溴甲酚紫的MRS固体培养基平板，静置，于37-43℃培养36-48h，挑选出呈黄色的菌落，将筛选得到具有典型乳酸菌特征的单一菌落初步定为乳酸菌；将初步确定的菌落在MRS固体培养基平板上反复划线几次，从而进一步进行纯化的目的，直至出现单一的形态一致的菌落，保藏菌种；
（2）目标菌株的筛选
将步骤（1）保藏的菌种按体积百分比1%接种量加入到含有1wt%的L-谷氨酸钠的液体发酵培养基，于37℃培养48h后；将发酵液离心后取上清液，同时配制浓度为10g/L的标准品L-谷氨酸和γ-氨基丁酸，将分别取2ul标准品和样品点样于层析纸上，在层析缸内进行层析，层析结束后将层析纸取出于70℃烘干80分钟，将能够把L-谷氨酸转化成γ-氨基丁酸的乳酸菌进行革兰氏染色和生理生化特性鉴定，然后进行16srDNA和API50-CHL糖发酵实验，选取革兰氏染色为阳性，过氧化氢酶实验为阴性的单一菌落，然后将γ-氨基丁酸高产的菌株进行16srDNA和API50-CHL糖发酵实验，得到一株高产γ-氨基丁酸的乳酸菌，该乳酸菌分类命名为短乳杆菌PDD-2株，于2018 年06月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.15954。
3.根据权利要求2所述的一种产γ-氨基丁酸的乳酸菌的筛选方法，其特征在于所述的含有溴甲酚紫的MRS固体培养基的配制方法如下：将MRS肉汤52.24g，溴甲酚紫0.04g，琼脂粉10g~20g，溶于1L蒸馏水中，于121℃灭菌20min即可；所述的层析液为正丁醇、冰醋酸和水按质量比5：3：2混合后，加入茚三酮使其质量百分数为1.2%，提前于30℃水浴锅中平衡16-18h备用。
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