[发明专利]阳离子醚化单宁酸及其制备方法以及基因体外释放载体

说明书

本发明公开一种阳离子醚化单宁酸及其制备方法以及基因体外释放载体，所述阳离子醚化单宁酸为具有结构式(1)所示结构的化合物。本发明提供的阳离子醚化单宁酸具有确定的分子结构式，从而在制备过程中可以通过常规的分离纯化手段得到纯度较高的产物，该产物用作基因组载体材料时使用剂量可控，解决了现有基因载体材料在实际应用时剂量不可控的问题。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种阳离子醚化单宁酸及其制备方法以及基因体外释放载体。

背景技术

基因治疗是将外源基因导入体内靶细胞从而达到预防或治疗目的的方法，其中基因载体是限制基因治疗发展的主要瓶颈之一，发展安全、高效的基因载体仍是突破基因治疗发展困境的主要研究热点。

现有基因载体主要包括病毒型和非病毒型两类，其中病毒型载体由于具有免疫原性、致癌性等缺点导致其应用和发展受到限制。因此，非病毒型基因载体的研究越来越受到重视，研究者对多种不同材料作为基因载体做了大量的工作和尝试，材料类型主要包括：阳离子脂质体、多聚阳离子有机高分子化合物、无机纳米粒子等材料，但这些材料普遍存在制备及表征过程复杂、毒性高、生物兼容性差等缺陷，仍然不能解决当前基因治疗发展对基因载体的要求。尤其是现有的多聚阳离子载体及无机纳米类载体，由于其制备过程复杂、分子量大，所制备的材料往往以不同分子量或粒径的混合物形式呈现，导致该类材料在实际应用到基因载体中时质量难以控制，故而很难准确地把握其使用剂量。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种阳离子醚化单宁酸及其制备方法，旨在解决现有基因载体材料在实际应用时使用剂量不可控的问题。

为实现上述目的，本发明提出一种阳离子醚化单宁酸，所述阳离子醚化单宁酸为具有以下结构式(1)所示结构的化合物：

为实现上述目的，本发明还提出一种如上所述的阳离子醚化单宁酸的制备方法，包括以下步骤：

步骤S10、将单宁酸溶解于氢氧化钠的水溶液中，得到单宁酸溶液；

步骤S20、向所述单宁酸溶液中加入吡啶和3-氯-2-羟丙基-三甲基氯化铵，在45～55℃温度下搅拌反应20～30h，得产物溶液；

步骤S30、对所述产物溶液进行分离纯化，得到阳离子醚化单宁酸。

优选地，在步骤S10中：所述单宁酸与所述氢氧化钠的摩尔比为1：(1～1.2)。

优选地，在步骤S20中：所述单宁酸、吡啶和3-氯-2-羟丙基-三甲基氯化铵的摩尔比为1：(25～35)：(1～1.5)。

优选地，步骤S20具体包括：

将所述单宁酸溶液在水浴环境中加热至45～55℃后，在搅拌作用下向所述单宁酸溶液中先加入吡啶，然后加入3-氯-2-羟丙基-三甲基氯化铵的水溶液，添加完毕后搅拌反应20～30h，得产物溶液。

优选地，在步骤S20中：所述3-氯-2-羟丙基-三甲基氯化铵的水溶液中的3-氯-2-羟丙基-三甲基氯化铵的质量百分比为65～70％。

优选地，步骤S30包括：

步骤S31、将所述产物溶液冷却至室温后装入透析袋中，先采用流水进行透析，然后采用去离子水进行透析，直至透出液中不含有季铵盐为止，收集截留液；

步骤S32、对所述截留液进行低温真空浓缩后，将浓缩产物先进行预冷冻后再冷冻干燥，得到的干燥产物即为阳离子醚化单宁酸。

优选地，在步骤S31中：所述透析袋的截留分子量为400～600；和/或，