[发明专利]一种微生物菌肥联合该菌发酵液抑制烟草黑胫病的方法

权利要求书

1.一种微生物菌肥联合该菌发酵液抑制烟草黑胫病的方法，其特征包括以下步骤：

(1)制备发酵菌液：将固体保存的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)采用改良产芽孢液体培养基进行发酵培养，得到含有蜡样芽孢杆菌的发酵菌液。

(2)制备菌肥：利用双次堆捂发酵的方法制备含有蜡样芽孢杆菌的生物菌肥；

(3)施用底肥：将步骤(2)所述含有该蜡样芽孢杆菌的生物菌肥作为底肥施用，每塘施用90克，每亩施用100公斤。

(4)浇灌发酵菌液：进行步骤(3)的同时将步骤(1)得到的含有蜡样芽孢杆菌发酵菌液按照5000倍稀释，浇灌烟株。

2.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合该菌发酵液抑制烟草黑胫病的方法，其特征在于：步骤(1)中发酵菌液中有效活菌数≥1.0亿/g(cfu) 。

3.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合该菌发酵液抑制烟草黑胫病的方法，其特征在于：步骤(1)中改良产芽孢液体培养基成分如下：葡萄糖1.5％、麦芽提取物2.5％、蛋白胨0.2％、NaCl 0.1％、(NH₄)₂SO₄ 0.1％、无水CaCl₂ 0.03％、ZnSO₄·7H₂O 0.02％，FeCl₃·6H₂O 0.002％，H₂O 1000m1。

4.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合该菌发酵液抑制烟草黑胫病的方法，其特征在于：步骤(2)中生物菌肥有效活性菌≥0.5亿/g(cfu)。

5.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合该菌发酵液抑制烟草黑胫病的方法，其特征在于：步骤(2)中双次堆捂发酵的方法为：第一次发酵：以质量百分比计，取40～50％的泥碳、10～20％的油枯、10～15％的花渣、20～25％的碳氨水以及1～5％的含有蜡样芽孢杆菌的发酵菌液，先混合均匀泥碳、油枯、花渣、碳氨水，加入总体积10％的水，每隔5天进行一次翻堆，堆捂时间为40天；第二次发酵：第一次发酵完成后，加入含有蜡样芽孢杆菌的发酵菌液，每隔5天进行一次翻堆，二次发酵时间为15天，堆捂发酵结束后，各项指标达到国家有机肥标准NY525-2011。

6.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合该菌发酵液抑制烟草黑胫病的方法，其特征在于：步骤(4)中浇灌烟株的具体方法为：待烟株移栽后浇灌烟株根部，每亩用量为10kg；在烟株生长幼苗期，比较稀疏时采用浇灌，待烟株生长后期，烟叶茂密时采用喷灌，使用喷灌系统喷施在烟株叶面上，叶部以及根部每次喷施均要浸透，每15天喷施1次，每个月喷施2次。

7.根据权利要求3所述的一种微生物菌肥联合该菌发酵液抑制烟草黑胫病的方法，其特征在于：所述液体培养基以及发酵菌液通过以下方法制备：分别称取上述组分并溶于1L蒸馏水中，待溶解后用pH计调节pH至6.5～7.2，将上述溶液装于三角瓶中放在灭菌锅中于121℃灭菌20分钟，待培养基冷却后用接种环沾取1ml蜡样芽孢杆菌转接到该培养基中，于37℃摇床100rpm振荡培养48hr。