[发明专利]一种高纯度核桃青皮多糖的提取方法

权利要求书

1.一种高纯度核桃青皮多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将核桃青皮洗净后晒干、研磨成青皮粉末；

（2）将青皮粉末与酶溶液充分混合均匀、酶解，得到酶解溶液，灭酶活性；

（3）浓缩酶解溶液，直接加入二氯甲烷溶剂，并超声振荡辅助提取，离心分离粉末渣，然后静置离心清液，待分层后保留二氯甲烷提取层；

（4）向二氯甲烷提取层中加入浓度为0.6～3wt%的氢氧化钠溶液，氢氧化钠溶液与二氯甲烷的体积比3～5:1，充分振荡5～15min后静置分层，保留二氯甲烷层，如此操作2～4次，每次加入的氢氧化钠溶液的浓度逐渐增加，体积比逐渐减小；

（5）将步骤（4）所得二氯甲烷层在常压下加热蒸发二氯甲烷，得到二氯甲烷挥发液和固体结晶，二氯甲烷挥发液加入（3）中再次使用；

（6）向固体结晶中加纯水，加热并充分溶解得到溶解液，经超滤膜超滤并截留分子量4000～15万的化合物分子，然后加入乙醇搅拌醇沉，收集得到的沉淀固体、通风干燥，得到高纯度核桃青皮多糖。

2.根据权利要求1所述的高纯度核桃青皮多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中加入的酶为木瓜蛋白酶或纤维素酶，酶溶液浓度为8～12wt%，青皮粉末与酶溶液的料液比为1g:14～20mL，酶解温度35～60℃，酶解时间3～7h。

3.根据权利要求1所述的高纯度核桃青皮多糖的提取方法，其特征在于，步骤（3）中二氯甲烷与浓缩酶解溶液体积比3～5:1，超声振荡功率150～200W，温度30～60℃，时间1～2h。

4.根据权利要求1或3所述的高纯度核桃青皮多糖的提取方法，其特征在于，步骤（3）还包括向粉末渣中再加入二氯甲烷超声辅助浸提萃取，这样操作1～3次，粉末渣与二氯甲烷的料液比为1 g:5～8mL，然后将分离得到的二氯甲烷萃取层与二氯甲烷提取层混合得到总的二氯甲烷提取层。

5.根据权利要求1所述的高纯度核桃青皮多糖的提取方法，其特征在于，步骤（4）中向二氯甲烷提取层中加入氢氧化钠溶液分层分离操作3次，氢氧化钠溶液浓度依次为0.6～0.8wt%、1.2～1.3wt%、2.0～2.4wt%，与二氯甲烷提取层体积比为3～5:1、3～5:1、1～2:1。

6.根据权利要求1所述的高纯度核桃青皮多糖的提取方法，其特征在于，步骤（6）中乙醇在溶解液中的体积浓度为60%～62v/v%，醇沉温度为1～5℃。

7.根据权利要求1或6所述的高纯度核桃青皮多糖的提取方法，其特征在于，步骤（6）还包括超滤前超声处理，超声功率为200～250W，超声时间10～15min，处理后静置10～20min。