[发明专利]一种高纯度核桃青皮多糖的提取方法

说明书

本发明涉及核桃青皮多糖提取领域，针对现有核桃青皮多糖的提取方法所得青皮多糖的纯度不高的问题，公开一种高纯度核桃青皮多糖的提取方法，将青皮粉末酶解后用二氯甲烷超声振荡辅助提取，然后经氢氧化钠溶液萃取，再蒸发二氯甲烷，然后溶解并经超滤膜超滤后，乙醇醇沉得到高纯度核桃青皮多糖。本发明的核桃青皮提取方法利用二氯甲烷多次提取核桃青皮多糖，然后依次通过氢氧化钠萃取、超滤膜超滤和乙醇醇沉得到高纯度的核桃青皮多糖，而且核桃青皮多糖的提取效率高。并且所得氢氧化钠萃取液可以作为胡桃醌等的提取原料液，二氯甲烷蒸发后可以重复使用，因此废液排放少，提取过程更加清洁环保。

技术领域

本发明涉及核桃青皮多糖提取领域，具体涉及一种高纯度核桃青皮多糖的提取方法。

背景技术

核桃也称胡桃，是深受人们喜爱的干果，原产地是伊朗，国内自汉朝时开始种植，在安徽、辽宁、河北、山东等地广泛种植，在浙江省的杭州临安也有大量的山核桃种植。而核桃青皮是核桃果实未成熟时期的外果皮，颜色呈深绿色，含有胡桃醌、氢化胡桃醌、脂肪酸、多酚物质、黄酮类化合物以及多糖等多种活性成分。干燥后的核桃青皮也称青龙衣，是常用的中药药材，经研究具有清热解毒、止痢明目、抗肿瘤的功效。现有对核桃青皮的利用研究主要集中在胡桃醌、氢化胡桃醌等的提取利用，且提取利用技术尚未成熟，而对青皮多糖等活性成分的关注等则更少。少量研究人员通过水提或超声提取等方法从核桃青皮中提取核桃青皮多糖，但是得到的多糖的提取效率低，而且纯度不佳，影响了核桃青皮多糖的利用，也使核桃青皮未能充分利用。而近年来随着核桃的大量推广种植，青皮的产生量也逐年增加，由于开发利用手段不充分，大量的核桃青皮堆弃在田间变成废弃物，不仅造成环境污染，也带来资源浪费。因此如何提取青皮多糖从而多方面充分利用核桃青皮，提高核桃青皮的利用效果，是未来核桃青皮资源利用开发的研究方向之一。

高俊仙(不同提取方法对核桃青皮多糖提取效果的影响，内蒙古林业，2018，第11期30～32)中比较了利用水提法、超声辅助提取法、微波辅助提取法、超声微波双辅助提取法等不同方法从核桃青皮中提取多糖的效果，并且认为超声微波双辅助提取法效率最高。但是上述研究所筛选的超声微波双辅助提取法的能耗大，且受限于微波使用，不适宜中试规模以上的推广，更重要的是仅关注多糖的提取率，对提高多糖纯度帮助不大。

发明内容

针对现有核桃青皮多糖的提取方法所得青皮多糖的纯度不高的问题，本发明的目的在于提供一种高纯度核桃青皮多糖的提取方法，有效提升得到的核桃青皮多糖的纯度。

本发明提供如下的技术方案：

一种高纯度核桃青皮多糖的提取方法，包括以下步骤：

(1)将核桃青皮洗净后晒干、研磨成青皮粉末；

(2)将青皮粉末与酶溶液充分混合均匀、酶解，得到酶解溶液，灭酶活性；

(3)浓缩酶解溶液，直接加入二氯甲烷溶剂，并超声振荡辅助提取，离心分离粉末渣，然后静置离心清液，待分层后保留二氯甲烷提取层；

(4)向二氯甲烷提取层中加入浓度为0.6～3wt％的氢氧化钠溶液，氢氧化钠溶液与二氯甲烷的体积比3～5:1，充分振荡5～15min后静置分层，保留二氯甲烷层，如此操作2～4次，每次加入的氢氧化钠溶液的浓度逐渐增加，体积比逐渐减小；

(5)混合(4)中所得二氯甲烷层，然后常压下加热蒸发二氯甲烷，得到二氯甲烷挥发液和固体结晶，二氯甲烷挥发液加入(3)中再次使用；

(6)向固体结晶中加纯水，加热并充分溶解得到溶解液，经超滤膜超滤并截留分子量4000～15万的化合物分子，然后加入乙醇搅拌醇沉，收集得到的沉淀固体、通风干燥，得到高纯度核桃青皮多糖。