[发明专利]一种光致电化学传感器检测瘦肉精雷托帕明的方法

说明书

本发明属于分析化学与光致电化学传感器领域，具体涉及一种光致电化学传感器检测瘦肉精雷托帕明的方法。用g‑C₃N₄/CuPPcs修饰金电极，孵育上分子探针，构建光致电化学传感器，在经过雷托帕明与适体DNA作用，以及与捕获复合物CP反应后，以光致电化学信号变化为分析信号，以实现对雷托帕明的测定。

技术领域

本发明属于分析化学与光致电化学传感器领域，具体为一种光致电化学传感器检测瘦肉精雷托帕明的方法。

背景技术

瘦肉精是一种肾上腺类神经兴奋剂，我国不允许在动物的饲料、饮用水中添加瘦肉精。瘦肉精的残留会通过食物链的作用蓄积于人体内，造成人体心率过速、心率失常、肌肉疼痛和晕眩等症状，甚至会导致死亡。因此，建立快速、有效的瘦肉精检测方法具有重要意义。由于食品基质复杂，动物源食品中瘦肉精残留的含量低，因此在仪器检测之前，食品样品需要进行前处理。动物源食品中瘦肉精的样品前处理方法主要有固相萃取、固相微萃取和液相微萃取。雷托帕明是属于瘦肉精的一种，是一种β型肾上腺素兴奋剂，如果在动物饲养中非法使用它来减少动物脂肪组织，增加蛋白质的含量，就会引起人类食物中毒，产生一些不良的反应，如肌肉震颤、心动过速、头痛等。现有的检测方法有胶体金免疫层析试纸法(陈莲英.三种常用“瘦肉精”多联胶体金免疫层析检测试纸的研发[D].华南农业大学,2012；王亚宾.检测硝基咪唑类药物、莱克多巴胺和安定残留的酶联免疫法的建立[D].山东大学,2011；励炯,林伟杰,王红青,等.HPLC-MS/MS测定动物源性中药中的3种β-受体激动剂残留[J].中国现代应用药学,2018,35(4):501-505；新型瘦肉精多残留胶体金检测卡的研制[J].现代食品科技,2018(1):233-238；郭艳琼,张晓光,邬杰,等.高效液相色谱—串联质谱法测定畜肉组织中四环素及3种β-受体激动剂的研究[J].畜牧与饲料科学,2018,241(4):16-20.)等，这些方法一定程度上能够满足市场需要，但是，方法复杂，操作繁琐。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种光致电化学传感器检测瘦肉精雷托帕明的方法。

本发明的目的是这样实现的：用g-C₃N₄/CuPPcs修饰金电极，孵育上分子探针，构建光致电化学传感器，在经过雷托帕明与适体DNA作用，以及与捕获复合物CP反应后，以实现对雷托帕明的测定；一种光致电化学传感器，包括如下步骤：

(1)g-C₃N₄/CuPPcs的合成

A、称取12g尿素于坩埚中，以5℃/min的升温速率，在550℃下煅烧4h。加热结束后，将坩埚自然冷却至室温，并将所得的产物g-C₃N₄收集，捻碎成粉末，供进一步使用。

B、在反应釜中加入0.24g的CuCl₂·2H₂O、1.00g的1,2,4,5-苯四甲腈、0.076g的(NH₄)₂Mo₂O₇和3.50g的尿素，在200℃下加热5h。加热完毕后自然冷却至室温，将反应物分别用超纯水、丙酮、甲醇清洗数次。真空干燥后，再分别用丙酮、甲醇和三氯甲烷回流12h。然后将得到的固体吸滤后得到聚合酞菁铜CuPPcs。将g-C₃N₄粉末和CuPPcs组成的一定量混合物分散在水中，在超声波下混合2h，得到g-C₃N₄/CuPPcs。

(2)3D DNA的合成

将四条DNA单链(P1，P2，P3，P4)一起溶解在缓冲液(10mM的Tris-盐酸，50mM的MgCl₂，pH 8.0)中，得终浓度为分别为50μM的DNA混合溶液。随后，将得到的混合物在95℃下加热2min，然后立即冷却至4℃，得到3D DNA结构。