[发明专利]一种胶质瘤预后标志物CPVL抑制剂及其应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种胶质瘤预后标志物CPVL抑制剂及其应用，现提出如下方案，一种胶质瘤预后标志物CPVL的抑制剂、一种抑制剂的试剂盒以及一种胶质瘤预后标志物CPVL的抑制剂在制备治疗胶质瘤药物中的应用。本发明有效的验证CPVL基因通过IFN‑γ信号通路参与了胶质瘤细胞凋亡的调控，为胶质瘤细胞的增殖、凋亡提供理论数据，为胶质瘤细胞的增殖、凋亡机制提供理论基础。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种胶质瘤预后标志物CPVL 抑制剂及其应用。

背景技术

胶质瘤是临床上最常见的颅内恶性肿瘤。由于各种理化、遗传等因素的影响，胶质瘤的发病率常居于颅内肿瘤首位，占颅脑肿瘤的 50％左右。胶质瘤因具有发病隐匿，生长速度快，易侵袭与转移，病死率高，平均生存期短等特点，已经成为了对人生命健康造成极大危害的疾病类型。目前采用的手术切除及放、化疗等传统疗法并未明显改善胶质瘤患者的预后效果，一直是中枢神经系统恶性肿瘤治疗中的一大难题，其根本原因在于胶质瘤的发病机制还不完全清楚。因此，阐明胶质瘤的发病机制具有重要的理论和实践意义。

胶质瘤是癌症基因组图谱(TCGA)项目研究的第一种癌症，大量的基因组数据有助于了解这种致命疾病的发病机制。虽然已经进行了深入的研究来检测和验证与胶质瘤细胞侵袭和细胞增殖相关的许多分子，但到目前为止只有少数分子机制被揭示并被转化为临床应用。越来越多的证据表明，诱导胶质瘤细胞凋亡是导致肿瘤发生性增强的早期事件。因此，寻找潜在的早期诱导凋亡的生物标志物对胶质瘤的诊断和预后评估具有重要的临床价值。基因芯片与微阵列表达谱是过去十年中广泛使用的技术，用于快速比较不同样品中大量基因的表达水平，使之适合于基因筛选。本研究利用基因芯片表达谱技术在胶质瘤中鉴定出一个新的功能基因CPVL。CPVL是羧肽酶家族成员之一， Mahoney J A等运用差异显示聚合酶链反应搜索人巨噬细胞限制基因时首次克隆和鉴定到CPVL，定位于人染色体7p14.3。CPVL主要集中于富含单核细胞和巨噬细胞的组织中，包括胎盘、脾脏、心脏和肾脏，但在免疫系统中，CPVL仅局限于髓系细胞中。CPVL在包括神经胶质瘤在内的各种肿瘤中的作用至今仍不清楚。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中的缺点，而提出的一种胶质瘤预后标志物CPVL抑制剂及其应用。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种胶质瘤预后标志物CPVL的抑制剂，其靶核酸序列如表1所示。

一种包含有权利要求1所述的抑制剂的试剂盒。

一种胶质瘤预后标志物CPVL的抑制剂在制备治疗胶质瘤药物中的应用，包含以下步骤，其步骤如下：

S1:检测CPVL基因在胶质瘤细胞株的表达；

将胶质瘤细胞株铺于细胞6孔板，置于37℃、5％CO₂细胞培养箱中培养，待细胞长满，提取各细胞的总RNA，应用real-timePCR技术对不同胶质瘤细胞的CPVL基因进行检测；同时提取各细胞的总蛋白，利用Western Blot技术对不同胶质瘤细胞中CPVL基因表达的蛋白进行检测。

S2:对胶质瘤标本进行CPVL蛋白表达的检测和分析；

提取胶质瘤标本的总RNA，应用real-timePCR技术对人脑胶质瘤组织和正常脑组织中的CPVL基因进行检测；然后提取组织标本的总蛋白，利用Western Blot技术对胶质瘤组织CPVL基因表达的蛋白进行检测；

将胶质瘤标本石蜡包埋，冰冻切片，运用免疫组化技术观察CPVL 基因在胶质瘤标本中的分布情况；并进一步比较CPVL基因表达分布情况与胶质瘤病理分期分级的相关性；