[发明专利]烟草MLO2、MLO6和MLO12基因在制备抗白粉菌烟草品种中的应用及其方法

权利要求书

1.同时敲低烟草MLO2、MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA在制备抗白粉菌烟草品种中的应用，其特征在于：所述MLO2的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述MLO6的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述MLO12的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；所述同时编辑MLO2, MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA的靶序列如SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述同时编辑MLO2, MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。

3.一种同时敲低烟草MLO2、MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA，其特征在于：所述多顺反子tRNA-sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。

4.含有权利要求3所述多顺反子tRNA-sgRNA的编辑失活载体，其特征在于：所述编辑失活载体由多顺反子tRNA-sgRNA连入pORE-Cas9载体Bsa I酶切位点处而得。

5.权利要求3所述多顺反子tRNA-sgRNA或权利要求4所述编辑失活载体在制备抗白粉菌烟草品种中的应用。

6.一种制备抗白粉病烟草品种的方法，其特征在于：构建同时敲除MLO2, MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA，然后连入pORE-Cas9载体Bsa I酶切位点处获得编辑失活载体，转化烟草，筛选抗性芽，生根培养，获得T0代转基因植株，自交获得T1代转基因种子，将T1代转基因种子播种在卡那霉素抗性MS培养基中，获得T1代转基因植株，筛选基因敲除突变植株，即得抗白粉病烟草品种；所述同时编辑MLO2, MLO6和MLO12基因的多顺反子tRNA-sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。