[发明专利]一种纳米硒益生菌冻干粉及其制备方法

说明书

本发明公开了一种纳米硒益生菌冻干粉及其制备方法，首先分别将嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌及双歧杆菌厌氧培养、活化；然后将活化后的上述三种菌种分别接种含有亚硒酸钠的MRS液体培养基中厌氧培养，得到三种菌种的发酵醪液；接着将三种菌种的发酵醪液混合后离心分离，得到益生菌沉淀，洗涤、离心、冻干处理后得到纳米硒益生菌冻干粉；本发明通过将嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌及双歧杆菌三种益生菌的保健功效和纳米硒最佳补硒形式相结合，制备成高活性纳米硒复合益生菌冻干粉，不仅富含益于人体肠道的微生物菌群平衡的益生菌、易于肠道吸收的矿物质、维生素、膳食纤维，更增添了纳米硒双重营养保健功能，且纳米硒粉体的粒径为60‑100nm。

技术领域

本发明属于复合益生菌粉制剂技术领域，特别涉及一种纳米硒益生菌冻干粉及其制备方法。

背景技术

硒(Se)是一种对生物系统有广泛影响的重要微量元素，包括抗氧化、抗癌、抗病毒和促进生长繁殖等生物学效应。缺硒可导致心血管疾病、癌症、大骨节病、病毒感染性疾病的发生。目前人体补硒的形式主要为传统的无机硒、有机硒。无机硒一般安全性低，服用稍一过量就会引起中毒，生物利用率低。有机硒是目前主要的补硒形式，有机硒比无机硒有较高的生物活性，但价格高，资源匮乏。研究发现LD₅₀无机硒(亚硒酸盐)为22.0mg/kg/bodyweight，有机硒(硒蛋氨酸)为25.6mg/kg/body weight，而纳米硒则为92.1mg/kg/bodyweight，说明纳米硒具有低毒高效的活性优势，作为一种高活性、高安全的补硒产品将成为替代其他形式硒营养制剂或药剂的最佳选择。

目前，纳米硒的合成有化学法与生物转化法，生物法转化的纳米硒具有结构单一均匀，呈现规则的球状，且稳定性好，可以耐受高温，不易转化成褐色或黑色，性能优于化学合成的纳米硒。国内外在利用微生物进行硒的还原方面研究的较多，目前报道的有利用固氮红细菌、假单胞菌、芽孢杆菌、棒状菌属、现嗜麦芽寡养单胞菌、大肠杆菌、根瘤菌、乳酸菌等微生物能将亚硒酸或者硒酸盐还原成红色纳米单质硒。多数微生物能耐受低浓度的亚硒酸及其盐并将其还原成纳米硒，但随着亚硒酸钠浓度的升高，对菌体的毒性增强，最终抑制菌体生长，影响纳米硒的转化率。

有机硒的微生物合成已有报道，其中，中国专利申请为采用一种富含硒的复合益生菌粉制剂及其制备(公开号为CN107772477A)中公开了采用单菌双歧杆菌合成有机硒，但并没有公开报道利用益生菌合成毒性最低的纳米硒；中国专利申请一种含有纳米硒、稀土元素的益生菌饲料添加剂及其制备方法(公开号为CN108094716A)中公开了一种用于动物饲料的添加剂，但作为富硒食品开发受到一定限制，且步骤较多、制备工艺复杂。

发明内容

针对现有技术中存在的技术问题，本发明提供了一种纳米硒益生菌冻干粉及其制备方法，本发明通过采用多种益生菌混合培养，制备含有纳米硒的富硒益生菌粉，集纳米硒高生理活性和益生菌保健双重功能于一体，为富硒产品的制备提供新途径。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种纳米硒益生菌冻干粉的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、菌种活化，将嗜酸乳杆菌接种在MRS液体培养基中，厌氧培养、活化，得到活化后的嗜酸乳杆菌；将嗜热链球菌接种在MRS液体培养基中，厌氧培养、活化，得到活化后的嗜热链球菌；将双歧杆菌接种在MRS液体培养基中，厌氧培养、活化，得到活化后的双歧杆菌；

步骤2、纳米硒转化，将活化后的嗜酸乳杆菌接种在含有亚硒酸钠的MRS液体培养基中厌氧培养，得到嗜酸乳杆菌发酵醪液；将活化后的嗜热链球菌接种在含有亚硒酸钠的MRS液体培养基中厌氧培养，得到嗜热链球菌发酵醪液；将活化后的双歧杆菌接种在含有亚硒酸钠的MRS液体培养基中厌氧培养，得到双歧杆菌发酵醪液；

步骤3、富纳米硒益生菌复配，将步骤2中得到的嗜酸乳杆菌发酵醪液、嗜热链球菌发酵醪液及双歧杆菌发酵醪液混合，得到混合发酵醪液；