[发明专利]鉴定蜜柑大实蝇和橘大实蝇的特异引物对及其应用

权利要求书

1.用于鉴定橘大实蝇和蜜柑大实蝇的成套引物对，由引物对甲和引物对乙组成；

所述引物对甲由Bm-F和Bm-R组成；

所述引物对乙由Bt-F和Bt-R组成；

所述Bm-F为序列表中序列1所示的单链DNA分子；

所述Bm-R为序列表中序列2所示的单链DNA分子；

所述Bt-F为序列表中序列3所示的单链DNA分子；

所述Bt-R为序列表中序列4所示的单链DNA分子。

2.一种用于鉴定橘大实蝇和蜜柑大实蝇的试剂盒，其包括权利要求1所述的成套引物对。

3.权利要求1所述的成套引物对或权利要求2所述的试剂盒在如下c1）-c8）中任一种中的应用：

c1）制备鉴定橘大实蝇和蜜柑大实蝇的产品；

c2）鉴定橘大实蝇和蜜柑大实蝇；

c3）制备鉴定待测实蝇为橘大实蝇还是蜜柑大实蝇的产品；

c4）鉴定待测实蝇为橘大实蝇还是蜜柑大实蝇；

c5）制备橘大实蝇和蜜柑大实蝇的疫情监测的产品；

c6）橘大实蝇和蜜柑大实蝇的疫情监测；

c7）制备预防橘大实蝇和蜜柑大实蝇的入侵和/或扩散的产品；

c8）预防橘大实蝇和蜜柑大实蝇的入侵和/或扩散。

4.一种鉴定或辅助鉴定待测实蝇为橘大实蝇还是蜜柑大实蝇的方法，包括如下步骤：以待测实蝇的基因组DNA为模板，分别采用权利要求1中所述的引物对甲和引物对乙进行PCR扩增；

若引物对甲PCR扩增得到大小为422 bp的目的片段，则待测实蝇为或候选为橘大实蝇；

若引物对乙PCR扩增得到大小为456 bp的目的片段，则待测实蝇为或候选为蜜柑大实蝇。

5.权利要求1中的引物对甲在如下d1）-d8）中任一种中的应用：

d1）制备鉴定橘大实蝇的产品；

d2）鉴定橘大实蝇；

d3）制备鉴定待测实蝇是否为橘大实蝇的产品；

d4）鉴定待测实蝇是否为橘大实蝇；

d5）制备橘大实蝇的疫情监测的产品；

d6）橘大实蝇的疫情监测；

d7）制备预防橘大实蝇的入侵和/或扩散的产品；

d8）预防橘大实蝇的入侵和/或扩散。

6.权利要求1中的引物对乙在如下e1）-e8）中任一种中的应用：

e1）制备鉴定蜜柑大实蝇的产品；

e2）鉴定蜜柑大实蝇；

e3）制备鉴定待测实蝇是否为蜜柑大实蝇的产品；

e4）鉴定待测实蝇是否为蜜柑大实蝇；

e5）制备蜜柑大实蝇的疫情监测的产品；

e6）蜜柑大实蝇的疫情监测；

e7）制备预防蜜柑大实蝇的入侵和/或扩散的产品；

e8）预防蜜柑大实蝇的入侵和/或扩散。

7.一种鉴定或辅助鉴定待测实蝇是否为橘大实蝇的方法，包括如下步骤：以待测实蝇的基因组DNA为模板，采用权利要求1中所述的引物对甲进行PCR扩增；

若PCR扩增得到大小为422 bp的目的片段，则待测实蝇为或候选为橘大实蝇；

若PCR扩增未得到大小为422 bp的目的片段，则待测实蝇不为或候选不为橘大实蝇。

8.一种鉴定或辅助鉴定待测实蝇是否为蜜柑大实蝇的方法，包括如下步骤：以待测实蝇的基因组DNA为模板，采用权利要求2中所述的引物对乙进行PCR扩增；

若PCR扩增得到大小为456 bp的目的片段，则待测实蝇为或候选为蜜柑大实蝇；

若PCR扩增未得到大小为456 bp的目的片段，则待测实蝇不为或候选不为蜜柑大实蝇。

9.引物对甲PCR扩增得到大小为422 bp的目的片段和/或引物对乙PCR扩增得到大小为456 bp的目的片段在如下f1）-f16）中任一种中的应用：

f1）制备鉴定橘大实蝇和蜜柑大实蝇的产品；

f2）鉴定橘大实蝇和蜜柑大实蝇；

f3）制备鉴定待测实蝇为橘大实蝇还是蜜柑大实蝇的产品；

f4）鉴定待测实蝇为橘大实蝇还是蜜柑大实蝇；

f5）制备鉴定橘大实蝇的产品；

f6）鉴定橘大实蝇；

f7）制备鉴定待测实蝇是否为橘大实蝇的产品；

f8）鉴定待测实蝇是否为橘大实蝇；

f9）制备鉴定蜜柑大实蝇的产品；

f10）鉴定蜜柑大实蝇；

f11）制备鉴定待测实蝇是否为蜜柑大实蝇的产品；

f12）鉴定待测实蝇是否为蜜柑大实蝇；

f13）制备橘大实蝇和/或蜜柑大实蝇的疫情监测的产品；

f14）橘大实蝇和/或蜜柑大实蝇的疫情监测；

f15）制备预防橘大实蝇和/或蜜柑大实蝇的入侵和/或扩散的产品；

f16）预防橘大实蝇和/或蜜柑大实蝇的入侵和/或扩散；

所述引物对甲由Bm-F和Bm-R组成；

所述引物对乙由Bt-F和Bt-R组成；

所述Bm-F为序列表中序列1所示的单链DNA分子；

所述Bm-R为序列表中序列2所示的单链DNA分子；

所述Bt-F为序列表中序列3所示的单链DNA分子；

所述Bt-R为序列表中序列4所示的单链DNA分子。