[发明专利]一种可供注射给药的海参皂苷纳米脂质体及其制备方法

说明书

本发明涉及药物载体领域，具体涉及一种可供注射给药的海参皂苷纳米脂质体及其制备方法。所述海参皂苷纳米脂质体由磷脂与胆固醇组成的双分子层膜和中心药物海参皂苷组成，包封率达99％以上且无溶血毒性。本发明通过将海参皂苷包裹于脂质双分子层中制备海参皂苷纳米脂质体，克服了海参三萜皂苷的溶血毒性，为海参皂苷作为抗肿瘤药物的研究与开发提供一个安全有效的载药系统。

技术领域

本发明涉及药物载体领域，具体涉及一种可供注射给药的海参皂苷纳米脂质体及其制备方法。

背景技术

海参(seacucumber)隶属于棘皮动物门(Echinoermata)、海参纲(Holothuroidea)、楯手目(Aspidochirota)动物，是一种珍贵的滋补药材。明代《食物本草》中记载海参有补元气、滋养五脏六腑和虚损的养生功能。清朝《本草纲目拾遗》将海参列为补益药物。海参中含有皂苷、脂肪酸、神经节苷脂和多糖等多种重要的生物活性物质，具有抗肿瘤、抗凝血、抗病毒、延缓衰老及增强免疫力等广泛的药理学作用。因此，从海参中提取分离生物活性物质成为研究热点之一。海参皂苷是海参体内重要的次生代谢产物，作为海参的化学防御物质，是毒素的主要成分。海参皂苷一般为三萜皂苷，它不仅对海参的生存具有重要的意义，而且还有抗肿瘤、抗菌、细胞毒性、溶血等药理活性。海参皂苷对肿瘤细胞的增殖具有较强的抑制活性，但是海参皂苷的强溶血毒性限制了其体内注射的应用。

脂质体作为网状内皮系统最成功的药物递送载体之一，具有制备简单、组织相容性好、细胞亲和性好、毒副作用低、靶向性和缓释性等优点。目前，脂质体作为抗肿瘤药物载体已受到国内外研究者的关注。

发明内容

本发明要解决的技术问题是海参皂苷对肿瘤细胞的增殖具有较强的抑制活性，但是海参皂苷的强溶血毒性限制了其体内注射的应用。

为解决上述问题，本发明将海参皂苷包裹于脂质双分子层中制备海参皂苷纳米脂质体，克服了海参三萜皂苷的溶血毒性，为海参皂苷作为抗肿瘤药物的研究与开发提供一个安全有效的载药系统。

为实现上述目的，本发明具体通过以下技术方案实现，一种可供注射给药的海参皂苷纳米脂质体，所述海参皂苷纳米脂质体由磷脂与胆固醇组成的双分子层膜和中心药物海参皂苷组成，包封率达99％以上且无溶血毒性。

一种上述海参皂苷类纳米脂质体的制备方法，包括以下步骤：

(1)海参皂苷提取：海参经干燥、粉碎、乙醇水溶液脱脂和提取、离心，将上清液减压浓缩、冷冻干燥，得海参总皂苷A；

(2)海参皂苷分离纯化：步骤(1)中的海参总皂苷A经大孔树脂柱层析、正相硅胶柱层析、减压反相硅胶柱层析分离纯化，得海参皂苷单体化合物EA；

(3)海参皂苷纳米脂质体制备：以磷脂和胆固醇为壁材，海参皂苷单体化合物EA为包封药物，采用薄膜分散法制备海参皂苷纳米脂质体。

进一步的，海参皂苷提取步骤具体为海参经低温干燥、粉碎机粉碎，用体积比50％～70％乙醇水溶液室温机械搅拌提取3～5次，提取液离心，合并上清液减压浓缩、冷冻干燥，得海参总皂苷A。

进一步的，海参皂苷分离纯化步骤具体为：步骤(1)中的海参总皂苷A利用HP-20型大孔树脂进行分离纯化，收集体积比50％～70％乙醇洗脱组分，减压浓缩，冷冻干燥得海参总皂苷B；海参总皂苷B经正相硅胶柱层析分离纯化，收集体积比氯仿：甲醇：水＝7：1～3：0.1～0.3的洗脱组分；将该洗脱组分再次经减压反相硅胶ODS进一步纯化，60％(v/v)甲醇水溶液减压洗脱，薄层检测收集皂苷组分，得海参皂苷单体化合物EA，其结构式为

分子量为1184.5。

进一步的，海参皂苷纳米脂质体制备步骤具体为：