[发明专利]一种洋白蜡花粉变应原浸提物、其浸液及其制备方法

说明书

本发明提供了本发明涉及一种洋白蜡花粉变应原浸液物、其浸液及其制备方法。该洋白蜡花粉变应原浸提物，其中含有洋白蜡花粉变应原蛋白如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。该浸液经洋白蜡花粉收集、干燥、脱脂、提取、超滤浓缩、冷冻干燥、复溶等工艺方法制得，其主要组分为洋白蜡花粉变应原、甘油、氯化钠、苯酚等。该洋白蜡花粉变应原浸液具有特异性高的特点，洋白蜡致敏蛋白组分提取充分，总生物效价稳定，有效期长，无菌效果好；其原液可有效用于变态反应疾病的皮肤点刺试验诊断、经适当稀释后可用于体外嗜碱性粒细胞活化试验诊断及特异性免疫治疗，可有效诊断由洋白蜡花粉诱发的变态反应疾病并对其进行特异性免疫治疗。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种洋白蜡花粉变应原浸液物、其浸液及其制备方法。

背景技术

人们对变态反应疾病的认识始于“花粉热”，花粉热又称过敏性鼻炎。1911年Noon和Freeman首次利用花粉提取液来治疗花粉热，变态原疾病治疗的历史从此开始。目前，变态反应性疾病是全球性重大卫生问题之一。工业化国家超过25％的人口被变应性哮喘、变应性鼻结膜炎及变应性皮炎困扰，其中以变应性哮喘最为常见。吸入致敏花粉是引发变应性哮喘及其他呼吸道变态反应性疾病的最重要因素。VRTA—L.A等调查发现近50％的变态反应性疾病患者对草类花粉过敏。

洋白蜡(Fraxinus pennsylvanica)原产北美，广泛存在于欧洲、美洲和亚洲；在我国广为栽培，多引种为行道及庭园树。其植物性状为乔木，小枝暗灰色，光滑有皮孔；圆锥花序生于前1年无叶的侧枝上，无毛；花药矩圆形，顶端有突尖；果实长圆筒形。洋白蜡的花期为每年的3—4月，花粉量极大，授粉季节大气中漂浮的浓度很高，因此是春季花粉症重要过敏原。近年来，北京地区多采用本植物作为行道树，因此，空气中含量也随之增高。

现在变应原特异免疫治疗的方法主要分为皮下注射给药免疫治疗和舌下给药免疫治疗。皮下注射给药免疫治疗已有100多年历史，其安全性和有效性已经被得到证明。上世纪90年代初，变应原舌下滴剂疫苗诞生，1998年，WHO宣布了变应原舌下滴剂疫苗安全和有效。

但是舌下给药免疫脱敏的方式相比皮下注射免疫给药，治疗周期长，短时间内疗效不显著，平均脱敏周期3-5年。在一个治疗周期中，舌下给药方式免疫脱敏给药量是皮下注射给药量的100倍。所以皮下注射给药免疫脱敏的方式相比舌下给药，虽然病人依从性差，但是治疗周期短，见效快，治疗费用低。

目前，用于洋白蜡花粉变应原的作为皮下注射免疫制剂的稳定性差，成分不确定，试剂存放一定时间后用于诊断洋白蜡花粉诱发的变态反应疾病时，阳性率降低，准确性低。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种含洋白蜡花粉变应原浸液，该浸液具有于特异性高，洋白蜡致敏蛋白组分提取充分且比例恒定，总生物效价稳定，有效期长的特点。其可有效用于变态反应疾病的皮肤点刺试验诊断及特异性免疫治疗，可有效诊断由洋白蜡花粉诱发的变态反应疾病并对其进行特异性免疫治疗。

为实现上述目的，本发明采用以下的技术方案为：

一种洋白蜡花粉变应原浸提物，其含有洋白蜡花粉变应原蛋白Fra p 1，所述Frap 1含有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。

一种洋白蜡花粉变应原浸液，所述变应原浸液中含如上所述的洋白蜡花粉变应原浸提物、体积比为0.2～0.4％的苯酚，体积比为45～55％的甘油和4.5～5.5g/L的NaCl，其pH值为6.0～8.0。

如上所述的洋白蜡花粉变应原浸液，优选地，所述洋白蜡花粉变应原的活性浓度为5000～20000BAU/ml，所述洋白蜡花粉变应原浸液的总蛋白浓度0.30～1.20mg/ml。