[发明专利]一种猪胰脂肪酶固定化的方法在审
| 申请号： | 201910206823.2 | 申请日： | 2019-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN109735530A | 公开（公告）日： | 2019-05-10 |
| 发明（设计）人： | 詹世平;王景昌;商雪航;侯维敏 | 申请（专利权）人： | 大连大学 |
| 主分类号： | C12N11/14 | 分类号： | C12N11/14 |
| 代理公司： | 大连八方知识产权代理有限公司 21226 | 代理人： | 卫茂才 |
| 地址： | 116622 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 固定化 猪胰脂肪酶 固定化酶 胰脂肪酶 种猪 生物医用高分子材料 氨基化二氧化硅 绿色催化剂 催化活性 高效环保 共价结合 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种猪胰脂肪酶固定化的方法，其特征在于，所述方法采用氨基化二氧化硅颗粒为载体，猪胰脂肪酶（IPPL）为固定化对象，猪胰脂肪酶与载体之间是依靠共价结合的方式相互连接的。
2.根据权利要求1所述的一种猪胰脂肪酶固定化的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
（1）将氨基化二氧化硅颗粒加入到0.1mol/L、pH=7~9的磷酸缓冲盐溶液(PBS)中，超声，在氮气保护下，加入戊二醛，戊二醛在上述PBS溶液中的体积浓度为0.5~2.5%，搅拌，离心弃去上清液，用0.01 mol/L PBS溶液清洗颗粒，即得载体溶液；
（2）在载体溶液中，加入4 mg/mL的猪胰脂肪酶（IPPL）溶液，恒温反应；其中IPPL溶液与0.1mol/L PBS溶液的体积比为10:1~4；
（3）反应结束后，离心弃去上清液，加入甘氨酸封闭，离心洗涤，用0.01 mol/L PBS（含0.001 mol/L的EDTA和0.008 mol/L的半胱氨酸）清洗颗粒并恒温干燥，得氨基化二氧化硅固定化酶颗粒。
3.根据权利要求2所述的一种猪胰脂肪酶（IPPL）固定化的方法，其特征在于，步骤（1）中PBS溶液的pH为7.5，戊二醛在上述PBS溶液中的体积浓度为2.0 %；步骤（2）中IPPL溶液与0.1mol/L PBS溶液的体积比为10:2，反应温度40℃，反应时间8h。
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