[发明专利]一种检测gag基因的引物对和荧光探针的组合和检测方法在审
| 申请号： | 201910207471.2 | 申请日： | 2019-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN109777891A | 公开（公告）日： | 2019-05-21 |
| 发明（设计）人： | 孙耀光;暴佳芳;姚连琦;张亮;席在喜 | 申请（专利权）人： | 上海邦耀生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 郭莲梅 |
| 地址： | 201100 上海市闵*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 慢病毒 荧光探针 引物 种检测 检出 检测技术领域 核苷酸序列 反向引物 检测样品 正向引物 组合检测 灵敏度 检测 | ||
1.一种检测gag基因的引物对和荧光探针的组合，所述gag基因来自慢病毒，其特征在于，所述引物对包括：SEQ ID NO.1所示的正向引物和SEQ ID NO.2所示的反向引物，所述荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根据权利要求1所述的引物对和荧光探针的组合，其特征在于，所述荧光探针一端标记有FAM荧光基团，另一端标记有TAMRA淬灭基团。
3.一种检测gag基因的方法，其特征在于，其包括：在PCR扩增体系中加入权利要求1或2所述的引物对和荧光探针的组合；所述PCR扩增体系含有提取自待检样品的DNA模板。
4.根据权利要求3所述的检测gag基因的方法，其特征在于，PCR扩增的退火温度为55-65℃；优选的，退火温度为62℃。
5.根据权利要求3所述的检测gag基因的方法，其特征在于，在PCR扩增体系还添加有二甲基亚砜。
6.根据权利要求5所述的检测gag基因的方法，其特征在于，
优选的，二甲基亚砜在PCR扩增体系中的浓度为1-10％；
优选的，二甲基亚砜在PCR扩增体系中的浓度为3％。
7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述荧光探针在PCR扩增体系中的浓度为：10-500pmol/ml；
优选的，荧光探针在PCR扩增体系中的浓度为380-420pmol/ml。
8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述正向引物在PCR扩增体系中的浓度为10-500pmol/ml；优选的，所述正向引物在PCR扩增体系中的浓度为240-260pmol/ml。
9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述反向引物在PCR扩增体系中的浓度为：10-500pmol/ml；
优选的，所述反向引物在PCR扩增体系中的浓度为240-260pmol/ml。
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