[发明专利]一种用于检测慢病毒的核酸组和检测方法有效
申请号: | 201910207739.2 | 申请日: | 2019-03-19 |
公开(公告)号: | CN109750124B | 公开(公告)日: | 2021-04-23 |
发明(设计)人: | 孙耀光;祁雪;姚连琦;张亮;席在喜 | 申请(专利权)人: | 上海邦耀生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 周文波 |
地址: | 201100 上海市闵*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 病毒 核酸 方法 | ||
1.一种用于检测慢病毒的核酸组,其特征在于,其包括用于检测慢病毒VSV-G基因的引物对,所述引物对包括:SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物;所述核酸组还包括碱基序列如SEQ ID NO.3所示的荧光探针。
2.根据权利要求1所述的核酸组,其特征在于,所述荧光探针一端标记有荧光基团,另一端标记有淬灭基团。
3.根据权利要求2所述的核酸组,其特征在于,所述荧光基团选自FAM、HEX、VIC、TET、CY5、CY3、Texas Red或JOE。
4.根据权利要求3所述的核酸组,其特征在于,所述淬灭基团选自TAMRA、Dabcyl、Eclipse、MGB、BHQ1或BHQ2。
5.一种检测慢病毒的方法,所述方法不以疾病诊断为目的,其特征在于,其包括:使用权利要求1-4任一项所述的核酸组对提取自待检样品的DNA待测样品进行PCR扩增。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,在PCR扩增的反应体系中,上游引物浓度为:10-500pmol/ml,下游引物浓度为:10-500pmol/ml。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,在PCR扩增的反应体系中,上游引物浓度为:240-260pmol/ml,下游引物浓度为:240-260pmol/ml。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,PCR扩增的反应体系含有如SEQ ID NO.3所示的荧光探针,所述荧光探针的浓度为:10-500pmol/ml。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述荧光探针的浓度为:380-420pmol/ml。
10.根据权利要求5-9任一项所述的方法,其特征在于,PCR扩增的反应体系还添加有0-10%的二甲基亚砜。
11.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,二甲基亚砜的浓度为3%。
12.根据权利要求5-9任一项所述的方法,其特征在于,PCR扩增的退火温度为55-65℃。
13.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,PCR扩增的退火温度为59℃。
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