[发明专利]一种酵母葡聚糖的绿色制备方法有效
申请号: | 201910216107.2 | 申请日: | 2019-03-20 |
公开(公告)号: | CN109797179B | 公开(公告)日: | 2021-02-09 |
发明(设计)人: | 戚春建 | 申请(专利权)人: | 常州市第二人民医院 |
主分类号: | C12P19/08 | 分类号: | C12P19/08;C12R1/645 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所(普通合伙) 43205 | 代理人: | 舒欣 |
地址: | 213164 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酵母 聚糖 绿色 制备 方法 | ||
本发明属于葡聚糖技术领域,尤其是涉及一种酵母葡聚糖的绿色制备方法:步骤1,将普通酵母细胞壁加入蒸馏水中,搅拌均匀形成悬浮液,恒温加热2‑4h,然后加入电气石并加入双氧水密封蒸煮2‑4h,保温2‑6h,取出电气石,离心后得到沉淀物;步骤2,将沉淀物将加入至蒸馏水中搅拌均匀,加入分散剂并加热搅拌形成悬浊液,然后加入碱液调节至pH为9‑11,得到碱性悬浊液;步骤3,将蛋白酶和电气石加入至碱性悬浊液中,恒温酶解4‑6h,取出电气石后离心,水洗得到不溶物;步骤4,将不溶物加入至丙酮中微波反应2‑5h,过滤后冷冻干燥得到酵母葡聚糖粉末。本发明以酵母细胞壁作为生产原料,以电气石作为辅助催化剂和辅助氧化剂,大大提升了酵母葡聚糖的产率。
技术领域
本发明属于葡聚糖技术领域,尤其是涉及一种酵母葡聚糖的绿色制备方法。
背景技术
目前酵母β-D-葡聚糖(简称酵母β-葡聚糖或酵母葡聚糖)是一种拥有良好生理功能的免疫调节剂(非特异性免疫增强剂),具有增强免疫力、抗肿瘤、抗菌消炎、抗氧化、促进伤口愈合、抗辐射、降低血脂等生理功效,但是它不溶于水和绝大多数其它溶剂,仅微溶于二甲亚砜,这严重限制了酵母葡聚糖的应用。
为了提高酵母葡聚糖的溶解度,国内外学者对其进行了修饰和改性研究,包括化学方法和物理方法。主要的化学修饰法有磷酸化、羧甲基化、硫酸酯化和磺基化修饰,通过在葡聚糖上连接这些极性基团来增加其溶解度。但是这类反应通常都要在液态均相或非均相体系中进行,需要消耗大量的溶剂,甚至是不安全有机溶剂以及酸、碱等,不仅成本高、污染严重,还可能造成安全隐患。主要的物理方法为超声解聚和氧化降解法,通过降低葡聚糖的分子量来增加其溶解度。但是超声解聚只能降低葡聚糖的分子量到一个极限恒定值,而氧化降解则会在葡聚糖中引入氧化剂等杂质。
发明内容
针对现有技术中的问题,本发明提供一种酵母葡聚糖的绿色制备方法,以酵母细胞壁作为生产原料,以电气石作为辅助催化剂和辅助氧化剂,大大提升了酵母葡聚糖的产率。
为实现以上技术目的,本发明的技术方案是:
一种酵母葡聚糖的绿色制备方法,包括如下步骤:
步骤1,将普通酵母细胞壁加入蒸馏水中,搅拌均匀形成悬浮液,恒温加热2-4h,然后加入电气石并加入双氧水密封蒸煮2-4h,保温2-6h,取出电气石,离心后得到沉淀物;
步骤2,将沉淀物将加入至蒸馏水中搅拌均匀,加入分散剂并加热搅拌形成悬浊液,然后加入碱液调节至pH为9-11,得到碱性悬浊液;
步骤3,将蛋白酶和电气石加入至碱性悬浊液中,恒温酶解4-6h,取出电气石后离心,水洗得到不溶物;
步骤4,将不溶物加入至丙酮中微波反应2-5h,过滤后冷冻干燥得到酵母葡聚糖粉末。
所述步骤1中的酵母细胞壁在蒸馏水中的浓度为15-45g/L,搅拌均匀的搅拌速度为500-1000r/min,恒温加热的温度为90-100℃。
所述步骤1中的电气石的质量是普通酵母细胞壁质量2-10%,所述双氧水的加入量是电气石质量的110-150%,所述密封蒸煮的温度为120-150℃,保温温度为80-90℃。
所述步骤2中的沉淀物在蒸馏水中的浓度为100-190g/L,所述分散剂采用聚乙烯吡咯烷酮,加入量是沉淀物质量的2-5%,所述加热搅拌的温度为50-70℃,搅拌速度为100-300r/min,所述碱液采用氢氧化钠溶液。
所述步骤3中的蛋白酶加入量是沉淀物质量的0.1-0.3%,所述电气石采用步骤1中的电气石。
所述步骤3中的恒温酶解的温度为30-40℃。
所述步骤4中的不溶物在丙酮中的浓度为10-30g/L,微波反应的温度为20-30℃,功率为300-500W。
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