[发明专利]多种改进型橙/红色荧光蛋白有效
| 申请号： | 201910218741.X | 申请日： | 2015-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN109897093B | 公开（公告）日： | 2022-05-20 |
| 发明（设计）人： | 孙春昀;谢良志;饶木鼎;赵淑环;徐明明;陈军 | 申请（专利权）人： | 北京义翘神州科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435;C12N15/65;C12N15/85 |
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| 地址： | 100176 北京市大兴*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多种 改进型 红色 荧光 蛋白 | ||
【权利要求书】：
1.一种新型红色荧光蛋白，其特征在于：
a)为珊瑚虫Discosoma sp.红色荧光蛋白DsRed的突变体；
b)其氨基酸序列为SEQ.ID.NO:5,包含了氨基酸替换E10Q，V16I，R17Y，E32V，R36K，H41T，K47Q，A64H，C116T，F117L，K121H，M141L，A145P，L150N，I161N，K163M，V175C，Q188K，Y193H，S197Y，I210V，G219A，L225Q；编码该蛋白的核苷酸序列为SEQ.ID.NO:4；且
c)该荧光蛋白在范围为532.5～587.5nm波长通道激发光下为红色荧光。
2.一种定位目的蛋白在细胞、动物活体表达的方法，该方法包括：
a)采用基因工程技术将SEQ.ID.NO:4与目的蛋白基因的3’端或5’端融合；
b)将融合蛋白的基因序列插入到适合的表达载体中；
c)将融合蛋白表达载体转染细胞或动物活体，并在上述细胞和活体的培养条件下培养合适的时间，获得包含SEQ.ID.NO:5氨基酸序列的红色荧光蛋白融合蛋白的表达；
d)在532.5～587.5nm波长通道激发光谱范围下观察目的蛋白在细胞、动物活体中的表达定位。
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