[发明专利]利用荧光定量PCR法检测FUT2基因类型的方法

权利要求书

1.利用荧光定量PCR法检测FUT2基因类型的方法，其特征在于：所述方法包括下述工艺步骤：

S1，获取待测样品全血基因组DNA；

S2，利用引物及荧光物质进行荧光定量PCR检测，其中，上游引物的序列如SEQ ID NO.1所示；下游引物的序列如SEQ ID NO.2所示：

S3，根据PCR检测后熔解曲线的熔解峰位置判断rs1047781位点的A/T突变情况，进而判断FUT2基因的类型为分泌型或非分泌型。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤S3中，判断方法如下：熔解峰位置在89.6℃±0.3，则rs1047781位点未发生A/T突变，FUT2基因的类型为分泌型；熔解峰位置在87℃±0.3，则rs1047781位点发生A/T突变，FUT2基因的类型为非分泌型。

3.据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤S2中，PCR反应程序分为4个步骤，具体如下：

①37℃5min，1个循环；

②95℃15min，1个循环；

③95℃15s，55℃20s，72℃20s，40个循环；

④95℃15s，60℃1min，95℃15s，60℃15s，1个循环。

4.据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述待测样品为血液、唾液或乳汁。

5.据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述荧光定量PCR反应体系，具体如下：2倍Premix Ex Taq^TMII PCR缓冲液12.5μL；10mol/L上游引物1μL；10mol/L下游引物1μL；终浓度2μM DNA模版2μL；ddH₂O 8.5μL，总体积25μL。

6.荧光定量PCR法判断母乳中岩藻糖基化低聚糖含量的方法，所述方法包括下述工艺步骤：

S1，获取母乳全血基因组DNA；

S2，利用引物及荧光物质进行荧光定量PCR检测，其中，上游引物的序列如SEQ ID NO.1所示；下游引物的序列如SEQ ID NO.2所示：

S3，根据PCR检测后熔解曲线的熔解峰位置判断rs1047781位点的A/T突变情况，进而判断FUT2基因的类型为分泌型或非分泌型；

S4，当FUT2基因的类型为非分泌型时，岩藻糖基化低聚糖在该哺乳期母乳中的含量较FUT2基因的类型为分泌型的母乳中岩藻糖基化低聚糖含量低至少50％。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述岩藻糖基化低聚糖是以α1-2/3糖苷键连接的岩藻糖基化母乳低聚糖，包括2′-岩藻糖基乳糖(2′LF),3′-唾液酸-3-岩藻糖基乳糖(3′S-3FL),3′-岩藻糖基乳糖(3FL),乳糖二岩藻四糖(LDFT),乳酰-N-岩藻五糖(LNFP),乳糖-N-新双岩藻基六糖(LNnDFH),乳新岩藻五糖(LNnFP)。