[发明专利]质控品及其制备方法、试剂盒及检测胎儿21和18三体综合征的方法

说明书

本发明涉及一种质控品及其制备方法、试剂盒及检测胎儿21和18三体综合征的方法，其使用具有单分子检测灵敏度和绝对定量能力的数字PCR技术，开发了一种简单有效的染色体非整倍体的无创产前检测新方法。使用孕妇外周血，能够对一个样本在约5小时完成无创产前检测。使基于数字PCR的无创产前检测技术能实现准确、快速、简便的产前筛查。且该检测试剂盒准确性达到99％，成本仅需NIPT技术的1/5，检测时间5个小时。

技术领域

本发明涉及一种质控品及其制备方法、试剂盒及检测胎儿21和18三体综 合征的方法。

背景技术

胎儿染色体非整倍体异常是严重的出生缺陷，最常见的包括21-三体综合征 (即唐氏综合征，其未干预的综合发病率高达1/750，且随着孕妇年龄增加风险 急剧增大)、18-三体综合征等。这类疾病将导致新生儿出现智力低下、生长发育 迟缓、多发畸形乃至死亡，且尚无有效治疗手段，而产前筛查和诊断可最有效 的避免此类患儿的出生。

针对染色体疾病的产前检测主要以血清学筛查、羊水穿刺诊断为主。但血 清学筛查准确度较低，具有5％的假阳性率及20-40％漏诊率；羊水穿刺虽然准 确度较高，但是对孕妇具有创伤性，有1％的流产风险，不便于大规模的产前检 测。因此，急需一种更有效安全的的检测手段。

自从在孕妇外周血中发现游离胎儿DNA以来，研究人员对其展开大量研究， 继而发展出基于二代测序技术的无创产前检测技术(NIPT)，此技术比传统唐氏 综合征血清学筛查更准确，比羊水穿刺更安全。因为其无创、安全、准确的特 点，受到医生和孕妇的认可并被临床快速接受，是目前二代测序技术最为成功 的临床应用。然而，但基于二代测序的无创产前检测技术尚存在检测周期长， 需要15个工作日出检测报告、技术门槛高、检测费用贵等不足，阻碍了其替代 传统产前筛查方法成为全面普查项目。

发明内容

本发明的目的在于提供一种质控品及其制备方法、试剂盒及检测胎儿21和 18三体综合征的方法，能实现准确、快速、简便的产前筛查。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：一种质控品，所述质控品为 用于检测胎儿21和18三体综合征的试剂盒的质控品，所述质控品含有阳性类 参照品、阴性类参照品和检测限类参照品；

所述阳性类参照品包括由P21溶液和P18溶液组成的成套参考品，所述P21 含有片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液和正常未孕女性的离体血浆 DNA溶液，所述P18溶液含有片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液分 别和正常未孕女性的离体血浆DNA溶液；

所述阴性类参照品包括由片段化的T13三体阳性细胞株系DNA溶液与正常 未孕女性的离体血浆DNA溶液所混合组成的混合液，即NT13溶液；

所述检测限类参照品包括由PL21溶液和PL18溶液组成的成套参考品，所 述PL21溶液含有所述片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液和正常未孕女 性的离体血浆DNA溶液，所述PL18溶液含有所述片段化的T18三体阳性细胞 株系DNA溶液和正常未孕女性的离体血浆DNA溶液。

进一步地，在所述P21溶液中，所述片段化的T21三体阳性细胞株系DNA 溶液的含量为10～20％wt；在所述P18溶液中，所述片段化的T18三体阳性细胞 株系DNA溶液的含量为10～20％wtt；在所述NT13溶液中，所述片段化的T13 三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为15％wt；在所述PL21溶液中，所述片段 化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为3～5％w；在所述PL18溶液中， 所述片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为3～5％w。