[发明专利]一种海洋细菌来源新型耐碱耐有机溶剂酯酶及应用有效
| 申请号： | 201910230293.5 | 申请日： | 2019-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN110004125B | 公开（公告）日： | 2022-05-20 |
| 发明（设计）人： | 许学伟;李杨;丁祎;吴月红;洪利国;程虹 | 申请（专利权）人： | 自然资源部第二海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N9/18 | 分类号： | C12N9/18;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 徐飞虎;徐关寿 |
| 地址： | 310012 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 海洋 细菌 来源 新型 耐碱耐 有机溶剂 应用 | ||
1.一种具有水解酶活性的分离的多肽，其与SEQ ID NO:2的多肽所示序列一致。
2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于：所述的具有水解酶活性的多肽来源于细菌Erythrobacter jejuensis。
3.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于：所述水解酶的催化中心为SEQ ID NO:2所示的161-165、255和285号氨基酸位置。
4.一种编码具有权利要求1所述多肽的多核苷酸，其与SEQ ID NO:1的核苷酸所示序列一致。
5.根据权利要求4所述的多核苷酸，其特征在于：所述的多核苷酸具有与SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列至少95％以上的同源性。
6.根据权利要求5所述的多核苷酸，其特征在于：所述的多核苷酸具有与SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列至少99％以上的同源性。
7.一种核酸构建体，其包含与一种或多种调控序列可操作地连接的权利要求4的多核苷酸，所述调控序列在合适的表达宿主中指导所述多肽的产生。
8.一种重组表达载体，其包含权利要求7的核酸构建体。
9.根据权利要求8所述的重组表达载体，其特征在于：所述的载体为原核表达载体如pET系列载体，pQE系列载体；酵母表达载体pPICZ-α-A，pHIL-D2，pPIC9，pHIL-S1；或动物细胞表达载体pSVK3、pMSG。
10.根据权利要求9所述的重组表达载体，其特征在于：所述的载体为大肠杆菌表达载体pSMT3。
11.一种宿主，其由权利要求8-10任一项所述的载体经转化或转染细菌、酵母或工程哺乳动物细胞得到。
12.根据权利要求11所述的宿主，其为E.coli细菌、甲醇酵母或中国仓鼠卵巢细胞。
13.根据权利要求12所述的宿主，其为E.coli细菌。
14.一种产生权利要求1-3任一项所述多肽的方法，其包括：
(a)、在有助于产生水解酶的条件下培养权利要求11所述的重组宿主细胞，其中所述宿主细胞包含SEQ ID N0:1所示核苷酸或其至少一个突变位点的核苷酸；
(b)、回收所述多肽。
15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于：所述方法步骤(2)中，回收方法包括离心、过滤、提取、喷雾干燥、蒸发或沉淀。
16.据权利要求15所述的方法，其特征在于：所述方法步骤(2)中，通过多种本领域已知的方法纯化，所述方法包括离子交换层析、亲和层析、疏水层析、聚焦层析、大小排阻层析或差示溶解度方法。
17.权利要求1所述的水解酶或权利要求11所述的能表达水解酶的宿主在催化C2-C10碳链脂肪酸酯类水解中的应用。
18.根据权利要求17所述的应用，其特征在于，所述短链脂肪酸酯为C4-C8短碳链脂肪酸酯。
19.根据权利要求18所述的应用，其特征在于，所述的C4-C8短链脂肪酸酯为具有C4-C8短碳链的对硝基苯酚酯。
20.根据权利要求19所述的应用，其特征在于，所述的C4-C8短链脂肪酸酯为对硝基苯酚丁酸酯、对硝基苯酚己酸酯和对硝基苯酚辛酸酯。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于自然资源部第二海洋研究所，未经自然资源部第二海洋研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910230293.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种磷脂酶D的编码基因及其表达和应用
- 下一篇：一种用于米糠脂肪酶的制备方法
