[发明专利]一种蒙桑种苗的组织培养方法

说明书

本发明提供了一种蒙桑种苗的组织培养方法，该方法以蒙桑休眠芽为外植体材料，以MS为基本培养基，通过向培养基中添加不同浓度的6‑BA、2,4‑D、IBA、GA₃、PVP‑40等物质，对蒙桑外植体依次进行继代培养、增殖培养和生根培养，得到完整植株。采用该方法可得到大量的蒙桑再生苗，解决了以种子繁殖产生的变异以及生长缓慢的问题，以及以扦插方式产生的病虫害传播问题。通过该方法能够明显提高蒙桑繁育系数，缩短了繁育周期。在本发明的实施例中，增殖期以9.3倍速率增殖，生根率为100％。

技术领域

本发明涉及林木繁育技术领域，具体涉及一种蒙桑种苗的组织培养方法。

背景技术

蒙桑(Morus mongolica)，别名岩桑，是理想的生态经济型树种，对北方地区的水土保持及生态修复可以起到十分积极的作用。主要分布在大青山山地、阴山南部黄土丘陵区、大兴安岭南部山地，以及科左后旗大青沟自然保护区。

蒙桑是异花授粉植物，播种繁殖的苗木易产生变异，不能保持母本的优良性状，且实生苗幼苗期生长缓慢，育苗周期长、繁殖系数低。扦插繁殖虽能保持母本的优良性状，但易积累病虫害，而且对母树的数量要求以及树型的破坏性大，极大地制约了蒙桑的优良种苗的推广种植。

植物组织培养产生的幼苗可保存母树的性状，且其生产不受时间、季节、环境等因素的影响，在短时间内可大量繁殖苗木。近些年来，随着技术的发展，组织培养的成本降低，繁殖数不断增加，可以有效低蒙桑优良苗木的市场价格，对新品种的选育及推广的很大的推动作用。然而，目前没有针对蒙桑种苗的相应组织培养方法。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种蒙桑种苗的组织培养方法。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

本发明涉及一种蒙桑种苗的组织培养方法，包括以下步骤：

(1)取蒙桑外植体并进行灭菌处理，得到无菌外植体；

(2)将所述无菌外植体接种于诱导培养基中进行诱导培养，得到诱导苗；

(3)将所述诱导苗接种于继代培养基中进行继代培养，得到继代苗；

(4)将所述继代苗接种于增殖培养基中进行增殖培养，得到丛生芽；

(5)将所述丛生芽接种于生根培养基中进行生根培养，得到生根苗。

优选地，步骤(1)中，所述外植体为蒙桑的休眠芽。

优选地，步骤(1)中，所述灭菌处理为将所述外植体依次使用酒精溶液和氯化汞溶液浸泡后，然后用无菌水冲洗。

优选地，步骤(1)中，所述酒精溶液的体积分数为75％，所述氯化汞溶液的质量浓度为0.1％。

优选地，步骤(2)中，所述诱导培养基是以MS培养基为基础，并添加6-BA、IBA、PVP-40、蔗糖和琼脂得到，所述诱导培养基中6-BA的浓度为1.0mg/L，IBA的浓度为0.5mg/L，PVP-40的浓度为500mg/L，蔗糖的浓度为20g/L，琼脂的浓度为5.5g/L，且所述诱导培养基的pH值为5.8～6.0。

优选地，步骤(2)中，所述诱导培养为将所述无菌外植体接种于诱导培养基中，在温度为25±2℃、光照强度为1500～2000Lx、光照时间为10～14h/天的条件下进行培养20天以上，直至无菌外植体生长至3cm左右，得到诱导苗。