[发明专利]一种生防菌HN-2及提取物在制备抑制病原真菌制剂上的应用在审
申请号: | 201910239698.5 | 申请日: | 2019-03-27 |
公开(公告)号: | CN110117557A | 公开(公告)日: | 2019-08-13 |
发明(设计)人: | 靳鹏飞;王雨;缪卫国;刘文波;王皓楠;谭峥 | 申请(专利权)人: | 海南大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/00;A01P1/00;C12R1/07 |
代理公司: | 深圳市千纳专利代理有限公司 44218 | 代理人: | 张新蕊 |
地址: | 570228 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 病原真菌 生防菌 提取物 制备 菌株发酵液 芒果炭疽病 抑菌 贝莱斯芽孢杆菌 新型生物农药 微生物领域 保藏 菌株 拮抗 应用 开发 | ||
1.一种生防菌HN-2在制备抑制病原真菌的制剂上的应用,所述生防菌HN-2为贝莱斯芽孢杆菌HN-2,其保藏编号为CCTCC NO:M 2018382。
2.一种生防菌HN-2的提取物在制备抑制病原真菌的制剂上的应用,所述的提取物是从权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌HN-2中提取得到的。
3.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于,所述的病原真菌为芒果炭疽病病原真菌。
4.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述的提取物为贝莱斯芽孢杆菌HN-2发酵液离心后所得的上清液,通过正丁醇萃取、酸沉淀和/或硫酸铵沉淀得到的脂肽类物质。
5.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于,所述的发酵液的制备方法为:将保存的生防菌菌株HN-2接种于LB培养基上28℃活化培养,培养2天,挑取适量生防菌HN-2加入到液体的LB培养基中,摇床28℃,180转/分钟摇菌48小时,即得发酵液。
6.如权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的正丁醇萃取的操作方法为:发酵液离心去除菌体,即得即无菌体发酵液;加入正丁醇萃取,分离得到上层正丁醇层,去除正丁醇溶剂即得提取物。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于:所述加入的正丁醇与无菌体发酵液的体积比为1:1。
8.如权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的酸沉淀的操作方法为:发酵液离心去除菌体,保留上清液,加入盐酸滴定至PH值为2,密封后冷藏,之后离心,弃去上清液,得到沉淀即可。
9.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的步骤(2)中,滴定所用的盐酸的摩尔浓度为2mol/L;冷藏的条件为4℃冷藏12小时,离心时控制转速10000转/分钟,离心10分钟。
10.如权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的硫酸铵沉淀的操作方法为:发酵液离心去除菌体,保留上清液,加入硫酸铵粉末,充分反应后,离心,弃去上清液,得到沉淀即可。
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