[发明专利]一种细胞培养基添加剂在审
| 申请号： | 201910243569.3 | 申请日： | 2019-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN109810936A | 公开（公告）日： | 2019-05-28 |
| 发明（设计）人： | 陈静娴;张向飞;张金龙;李慧文;付春艳;傅海滢;王洁;樊红柳;赵峻 | 申请（专利权）人： | 成都峻宇生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00 |
| 代理公司： | 成都正华专利代理事务所(普通合伙) 51229 | 代理人： | 李蕊 |
| 地址： | 610041 四川省成都市中国（四川）*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞培养基 添加剂 传代 动物血清 营养物质 提取液 羊胚胎 羊胎盘 丙种球蛋白 抗氧化因子 细胞 生长因子 胎牛血清 细胞生长 有效培养 有效物质 转铁蛋白 白蛋白 提取物 小分子 制备 蛋白 生长 进口 | ||
1.一种细胞培养基添加剂，其特征在于，包括：
羊胚胎或羊胎盘提取液；以及
动物血清/浆；
其中，羊胚胎或羊胎盘提取液添加到细胞培养基中的终浓度为0.15-0.45mg/ml，动物血清/浆体积为培养基体积的1-5％。
2.根据权利要求1所述的细胞培养基添加剂，其特征在于，还包括抗氧化因子。
3.根据权利要求1或2所述的细胞培养基添加剂，其特征在于，羊胚胎或羊胎盘提取液通过以下方法制备得到：
(1)将羊胚胎或羊胎盘用含抗生素的生理盐水清洗干净，切块，粉碎，然后按1g：2-3ml的比例向组织中添加提取溶剂，匀浆；
(2)于0-40℃条件下搅拌匀浆3-6h，然后调pH值为4.9-5.0；
(3)将步骤(2)所得物离心，取上清，并调节上清液pH值为6.3-6.4，然后于55-65℃热处理8-12min；
(4)重复步骤(2)和步骤(3)1-2次；
(5)将热处理后的物质离心，取上清，进行灭活，并调节pH值至7.0-7.4，然后再用超滤膜包处理，制得羊胚胎或羊胎盘提取液。
4.根据权利要求3所述的细胞培养基添加剂，其特征在于，步骤(1)中羊胚胎或羊胎盘来源于山羊或绵羊孕中、晚期的胚胎。
5.根据权利要求3所述的细胞培养基添加剂，其特征在于，步骤(1)中提取溶剂为水、细胞培养基、1％牛磺酸钠溶液或PBS。
6.根据权利要求3所述的细胞培养基添加剂，其特征在于，步骤(2)中调pH值为5.0；步骤(3)中于60℃热处理10min。
7.根据权利要求1所述的细胞培养基添加剂，其特征在于，动物血清/浆来源于动物脐血、胚胎血或富血小板因子血浆。
8.根据权利要求1所述的细胞培养基添加剂，其特征在于，抗氧化因子包括谷氨酰胺、丙酮酸钠和维生素C，谷氨酰胺、丙酮酸钠和维生素C在细胞培养基中的终浓度分别为2-3mM、1-2mM、15-30μg/ml。
9.一种细胞培养基，其特征在于，包括基础培养基和权利要求1-8任一项所述的细胞培养基添加剂。
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