[发明专利]一种L-2-氨基丁酸的制备方法有效
申请号: | 201910246388.6 | 申请日: | 2019-03-29 |
公开(公告)号: | CN109777845B | 公开(公告)日: | 2023-06-30 |
发明(设计)人: | 郭恒华;刘磊;张冬竹;刘树蓬;章晖;田宋魁 | 申请(专利权)人: | 安徽华恒生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12P13/04 | 分类号: | C12P13/04 |
代理公司: | 合肥诚兴知识产权代理有限公司 34109 | 代理人: | 汤茂盛 |
地址: | 230000 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 氨基 丁酸 制备 方法 | ||
1.一种L-2-氨基丁酸的制备方法,其特征在于:在底物中加入酶催化剂和酶激活剂,在30±5℃条件下反应16~20h;
所述底物为苏氨酸和甲酸铵,苏氨酸和甲酸铵的浓度分别为100~200g/L和50~200g/L;
所述酶催化剂为产苏氨酸脱氨酶、亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的微生物菌液;加入产苏氨酸脱氨酶、亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的微生物菌液后,混合溶液中总酶浓度为3~6U;将大肠杆菌来源的L-苏氨酸脱氨酶、芽孢杆菌来源的L-亮氨酸脱氢酶、博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶,通过基因工程菌的方法导入到大肠杆菌中,构建同时产L-苏氨酸脱氢酶、L-亮氨酸脱氢酶、甲酸脱氢酶的微生物;所述大肠杆菌来源的L-苏氨酸脱氨酶的核苷酸序列是NCBI上Gene ID:948287的核苷酸序列,所述芽孢杆菌来源的L-亮氨酸脱氢酶的核苷酸序列是NCBI上Gene ID:1206507的核苷酸序列,所述博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶的核苷酸序列是NCBI上GenBank:KM454879.1的核苷酸序列;
所述酶激活剂为磷酸盐,磷酸盐加入量为:磷酸根离子浓度为10mmol~20mmol/L;加入磷酸盐后,加入pH调节剂调节混合溶液的pH值至7~8;所述磷酸盐为磷酸二氢铵、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二铵、磷酸氢钙、磷酸钙、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸钠中的至少一种。
2.根据权利要求1所述L-2-氨基丁酸的制备方法,其具体步骤为:
A)向水中加入苏氨酸和甲酸铵,配制成转化液A;
B)向转化液中加入磷酸盐得溶液B;
C)向溶液B中加入苏氨酸脱氨酶、亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶,在30±5℃条件下反应16~20h,反应结束后即得L-2-氨基丁酸溶液。
3.根据权利要求1或2所述的L-2-氨基丁酸的制备方法,其特征在于:苏氨酸与甲酸铵的质量比为2:1~2。
4.根据权利要求1所述L-2-氨基丁酸的制备方法,其特征在于:所述pH调节剂为氨水、氢氧化钠、氢氧化钾中的至少一种。
5.根据权利要求1或2所述L-2-氨基丁酸的制备方法,其特征在于:制备过程中所用水为自来水。
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