[发明专利]产胍基乙酸的工程菌及其构建方法与应用

权利要求书

1.一种产胍基乙酸工程菌的构建方法，包括如下步骤：将与胍基乙酸合成相关基因L-精氨酸：甘氨酸脒基转移酶编码基因导入宿主菌，得到产胍基乙酸工程菌；所述宿主菌为突变型大肠杆菌；

所述突变型大肠杆菌为按照如下a1至a7的全部方式制备的重组大肠杆菌：

a1.提高所述大肠杆菌中氨甲酰磷酸合成酶II编码基因的表达或活性；

a2.提高所述大肠杆菌中鸟氨酸氨甲酰转移酶编码基因的表达或活性；

a3.提高所述大肠杆菌中谷氨酰胺合成酶编码基因的表达或活性；

a4.提高所述大肠杆菌中精氨酰琥珀酸合成酶编码基因的表达或活性；

a5.提高所述大肠杆菌中精氨酰琥珀酸裂解酶编码基因的表达或活性；

a6.提高所述大肠杆菌中天冬氨酸裂氨酶编码基因的表达或活性；

a7.降低或抑制所述大肠杆菌中甘氨酸脱羧酶编码基因的表达或活性。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述L-精氨酸：甘氨酸脒基转移酶为如下A1-A6任一种：

A1.Amycolatopsis kentuckyensis来源的L-精氨酸：甘氨酸脒基转移酶；

A2、Homo sapien来源的L-精氨酸：甘氨酸脒基转移酶；

A3.Actinokineospora terrae来源的L-精氨酸：甘氨酸脒基转移酶；

A4.Cylindrospermopsis raciborskii来源的L-精氨酸：甘氨酸脒基转移酶；

A5.Moorea producens来源的L-精氨酸：甘氨酸脒基转移酶；

A6.Micromonospora rifamycinica来源的L-精氨酸：甘氨酸脒基转移酶。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：

a1中，所述提高所述大肠杆菌中氨甲酰磷酸合成酶II编码基因的表达或活性为将大肠杆菌中氨甲酰磷酸合成酶II编码基因的启动子替换为CPA1启动子；

或，a2-a6中，提高各个编码基因的表达或活性为将各个编码基因导入所述大肠杆菌中；

或，a7中，所述降低或抑制大肠杆菌中甘氨酸脱羧酶编码基因的表达或活性为敲除所述大肠杆菌中甘氨酸脱羧酶编码基因。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：

所述将各个编码基因导入所述大肠杆菌中为将表达各个基因的重组载体导入所述大肠杆菌中。

5.一种大肠杆菌突变体，为权利要求1-4任一方法中的所述突变型大肠杆菌。

6.由权利要求1-4任一方法制备的产胍基乙酸工程菌。

7.权利要求6所述的产胍基乙酸工程菌在制备胍基乙酸中的应用；

或，权利要求5所述的大肠杆菌突变体在制备瓜氨酸或精氨酸或产胍基乙酸中的应用。

8.一种制备胍基乙酸的方法，包括如下步骤：

将权利要求6所述的产胍基乙酸的基因工程菌经阿拉伯糖诱导培养得到诱导后重组菌，用所述诱导后重组菌催化精氨酸与甘氨酸反应，得到胍基乙酸；

或，一种制备瓜氨酸和/或精氨酸的方法，包括如下步骤：

将权利要求5所述的大肠杆菌突变体经阿拉伯糖诱导培养得到诱导后重组菌，用所述诱导后重组菌催化鸟氨酸反应，得到瓜氨酸和/或精氨酸。