[发明专利]一种果桑“白玉王”的组织培养方法

说明书

一种果桑“白玉王”的组织培养方法，其特征在于，所述培养方法包括以下步骤：(1)材料选择、(2)外植体前处理、(3)外植体灭菌消毒、(4)外植体接种及腋芽诱导培养、(5)增殖培养、(6)生根培养、(7)炼苗和移栽；本发明提供一种果桑“白玉王”的组织培养方法，可以快速繁殖种苗，提高成活率，从而可以增加桑果产量，提高经济效益。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种果桑“白玉王”的组织培养方法。

背景技术

桑树是多年生木本植物,属于落叶树种,主要分布于温带和亚热带地区。我国果桑主要分布在江苏、广东、广西、湖北、陕西等地。“白玉王”该品种树形开展，枝条细直，叶较小，花芽率高，果长3.5-4.0厘米，果径1.5厘米左右，长筒形，单果重4-5克，最大10克，果色乳白色，汁多，甜味浓，含糖量高达20％，适应性强，抗旱耐寒，是一个大果型叶果兼用品种。近几年随着人们营养保健意识的逐渐增强和对果品需求多样化，掀起了果桑发展热。因此开发利用果桑，具有广阔的市场前景，但运用组培技术对果桑“白玉王”进行工厂化育苗,国内尚无报道。因此,我们对果桑“白玉王”进行了组培快繁技术研究,为快速繁殖种苗提供参考。

发明内容

本发明提供一种果桑“白玉王”的组织培养方法，可以快速繁殖种苗，提高成活率，从而可以增加桑果产量，提高经济效益。

本发明为实现上述目的，通过以下技术方案予以实现：一种果桑“白玉王”的组织培养方法，所述培养方法包括以下步骤：

(1)材料选择

果桑“白玉王”采摘于沭阳县东小店乡店东村果桑种植园，白玉王当年生、健壮无病虫害的嫩枝枝条上带侧芽的茎段作为外植体；

(2)外植体前处理

每个外植体剪成3-4厘米一段，每段至少有一个侧芽，先用2％洗衣粉浸泡20分钟去除表面污垢后,再用流动的自来水冲洗1小时；

(3)外植体灭菌消毒

对外植体进行前处理后，转入超净工作台进行消毒处理:用75％的酒精灭菌30s，然后用0.1％的升汞加吐温2滴约0.01ml进行浸泡，时间为8-10min，再用无菌水冲洗5遍，最后用无菌滤纸吸干,接入腋芽诱导培养基中；

(4)外植体接种及腋芽诱导培养

先将培养瓶的封口膜轻轻取下，放在一边，将培养瓶口在酒精灯外焰上旋转灼烧消毒，杀死瓶口的微生物；将枪式镊子在酒精灯上灼烧消毒并冷却后，培养瓶中放置腋芽诱导培养基，将外植体接种到培养瓶中的诱导培养基中；

诱导培养基选用：2984.24mg/LMS+0.5-2.0mg/L BA+0.5-3.5mg/L IBA，培养25d～30d后进行无菌苗增殖培养；

(5)外植体的增殖培养

外植体经诱导培养生成愈伤组织或丛生芽当长到0.5厘米时，转接至放有增殖培养基的培养瓶中进行增殖培养，增殖培养基可选用：2984.24mg/LMS+0.5-3.5mg/L BA+05-2.0mg/L IBA+100mg/L肌醇+0.2mg/L稀效唑+60g/L淀粉，培养25-30d；

(6)生根培养

选取放有增殖培养基的培养瓶中长度2.0cm～3.0cm生长健壮的芽接种至放有生根培养基的培养瓶，生根培养基可选用：1492.12MS+0.5-2.0mg/L NAA+60g/L淀粉+食用糖30g/L；根苗接入放有生根培养基的培养瓶中培养15-20d后,从试管苗剪口基部长出5-8条嫩白色的幼根，40d后长出完整根系，平均根数6条以上，根长约在4.0cm-6.0cm；

(7)炼苗和移栽