[发明专利]一种α-葡萄糖醛酸酶检测试纸的制备方法

说明书

本发明涉及一种α‑葡萄糖醛酸酶检测试纸的制备方法，浸液A、B均以水为溶剂，干燥时间一致，可以减少干燥工时；浸液A中缓冲体系为反应提供一个良好的反应环境；酸类物质为反应提供一个终止条件。浸液B中分散剂PVP‑K30、PVP‑K90、PEG‑2000、PEG‑4000、PEG‑6000单独或联合使用可以增加试纸的分散能力，有助于颜色的均匀分布；稳定剂蔗糖、海藻糖、葡萄糖、乳糖、半乳糖、阿拉伯糖等可以保护样本中的酶类物质，提高检测的准确度。本发明的检测试纸制备过程简便，使用方便，容易操作，检测时不需要显微镜等特殊设备，结合迪瑞GMD‑S600全自动妇科分泌物分析系统，在8‑10min内即可出结果，具有检测速度快，灵敏度高、特异性好的优势，与类似产品相比操作简单，适宜普及。

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂技术领域，具体涉及一种α-葡萄糖醛酸酶检测试纸的制备方法。

背景技术

滴虫性阴道炎和霉菌性阴道炎均为妇科常见病、多发病。滴虫性阴道炎易发生于孕龄妇女，霉菌性阴道炎易发生在孕妇，糖尿病以及肥胖者。国外报道约有80％的孕妇阴道携带霉菌，携带者出现症状可高达60％-90％。对1000例孕妇进行白带图片检查，霉菌性检出率高达18.7％，其中6.6％有临床症状。而主要的发病是由于感染的阴道毛滴虫消耗了阴道内的糖原，破坏了阴道的自净防御机能，继发细菌感染所致。临床上，滴虫培养一直是国内及国际公认的诊断滴虫性阴道炎的金标准，但临床上检测滴虫基本上是常规镜检。显微镜镜检对镜检人员经验性要求高，且气温低可影响滴虫的活动性而导致漏检。经过临床研究表明，滴虫具有α-葡萄糖醛酸酶特异性酶，故可以通过检测α-葡萄糖醛酸酶来判定滴虫感染。

真菌性阴道炎由真菌(主要为白色念珠菌属)感染引起，其发病率已高于滴虫性阴道炎。真菌有许多种，在人体最主要的为白色念珠菌属。常规镜检法检测念珠菌，镜下不易观察到念珠菌孢子及菌丝，极易漏检及误检。α-葡萄糖醛酸酶和脯氨酸氨基肽酶均为白色念珠菌的特异性酶。故干化学酶法的检测试纸，通过检测酶的活性来判定念珠菌感染，可以降低念珠菌漏检率。由于滴虫、真菌均分泌α-葡萄糖醛酸酶，所以采用干化学法检测α-葡萄糖醛酸酶对患者的临床检测具有一定的指导意义。

α-葡萄糖醛酸酶作为木聚糖降解的限速酶之一，在木聚糖类半纤维素的生物转化中起着重要的作用，但是α-葡萄糖醛酸酶具有很低的生物活性，并且对人工生色底物不能分解，因此，到目前为止，该酶活性的测定还不能用人工生色底物来替代。常用于α-葡萄糖醛酸酶活性分析的底物主要有4-O-甲基葡萄糖醛基木二糖，木三糖(4-O-MeGlcAX2，4-O-MeGlcAX3)，4-D-甲基葡萄糖醛酸基木糖醇(4-O-MeGlcA-xylitol)等天然底物，结果产生的4-O-甲基葡萄糖醛酸(4-O-MeGlcA)使得还原糖增加而显示出其活性，基于这种特点，使得这种检测α-葡萄糖醛酸酶的方法具有一定的特异性。最早采用的方法有气相色谱，离子交换色谱，薄层色谱和硼酸盐复合物离子交换色谱对酶降解产物进行分离。其中离子交换色谱是检测4-O-甲基葡萄糖醛酸酶活性的有效工具，但是，该法操作比较繁琐，不利于指导滴虫性阴道炎和霉菌性阴道炎的临床检测。

发明内容

本发明要解决现有技术中的技术问题，提供一种α-葡萄糖醛酸酶检测试纸的制备方法，制备的检测试纸具有检测速度快，灵敏度高、特异性好的优势，与类似产品相比操作简单，适宜普及。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案具体如下：

一种α-葡萄糖醛酸酶检测试纸的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、浸液的制备

浸液A包括底物、缓冲溶液和辅助试剂；

将底物溶解于带缓冲溶液和辅助试剂的溶液中，得到浸液A；

所述底物为4-O-甲基葡萄糖基木寡糖、或者其不同糖链衍生物，或者为4-O-甲基葡萄糖醛酸基木糖醇、或者其衍生物；