[发明专利]一种微囊藻毒素抗体Fab片段的制备方法和应用有效
| 申请号： | 201910251588.0 | 申请日： | 2019-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN110028581B | 公开（公告）日： | 2022-02-11 |
| 发明（设计）人： | 雷红涛;焦文阳;沈兴;王兰腾;徐振林;孙远明 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C07K16/12 | 分类号： | C07K16/12;C12N15/13;C12P21/06;C07K1/16;G01N33/68 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈嘉毅 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 微囊藻 毒素 抗体 fab 片段 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种微囊藻毒素抗体Fab片段，其特征在于，包括重链和轻链，其重链的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，其轻链的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示。
2.一种编码微囊藻毒素抗体Fab片段的基因，其特征在于，编码其重链的核苷酸序列如SEQIDNO：3所示，编码其轻链的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示。
3.一种权利要求1所述微囊藻毒素抗体Fab片段的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.将包含权利要求1所述微囊藻毒素抗体Fab片段的序列的微囊藻毒素单克隆抗体IgG用木瓜蛋白酶酶切得到酶切产物；
S2.将步骤S1的酶切产物经Superdex75凝胶过滤层析柱进行一步纯化，具体的，样品上柱后先使用PBS缓冲液冲洗，再使用超纯水冲洗，透析，即可得到Fab片段。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S2所述PBS缓冲液中PB的摩尔浓度为大于或等于5mM，NaCl的摩尔浓度为大于或等于10mM，pH为小于或等于8。
5.权利要求3～4所述方法制备得到的微囊藻毒素抗体Fab片段在检测微囊藻毒素中的应用。
6.一种微囊藻毒素免疫学的检测方法，其特征在于，利用权利要求1所述的微囊藻毒素抗体Fab片段作为抗体，MC-LR-OVA人工抗原作为抗原进行检测。
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