[发明专利]一种均相化学发光法检测促甲状腺激素的试剂盒在审
| 申请号： | 201910254835.2 | 申请日： | 2019-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN109884325A | 公开（公告）日： | 2019-06-14 |
| 发明（设计）人： | 成舜 | 申请（专利权）人： | 常州普林森科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/78 | 分类号： | G01N33/78;G01N33/58;G01N33/532;G01N21/76 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 213000 江苏省常州市武进区延政西大道8*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甲状腺激素 试剂盒 检测 化学发光 抗体 化学发光法检测 吖啶衍生物 抗体制备 灵敏度 夹心法 简易 芯片 血液 | ||
1.一种能够同时检测促甲状腺激素（TSH）浓度的试剂盒，所述方案通过如下步骤实现：（1）TSH抗体制备；（2）吖啶衍生物标记TSH抗体；（3）Fermin标记TSH抗体；（4）夹心法检测。
2.根据权利要求1所述的芯片，其特征在于步骤（2）中所述吖啶衍生物标记TSH抗体的方法为：
（1）将多聚赖氨酸溶解于1mL10-200mM PBS缓冲液（pH7.4）中，终浓度5-20nmol/L，加入10μL溶解于DMSO溶剂的5-20mmol/L吖啶酯，于25℃反应0.5-2h，用5mL 7KD截留分子量的脱盐柱（Thermo fish公司)以10-200mM PBS（pH7.4）缓冲液作为换液缓冲液，过柱3遍，除去游离的吖啶酯及反应副产物，得到吖啶-多聚赖氨酸溶液；
（2）向上述纯化过的吖啶-多聚赖氨酸溶液中加入EDC(终浓度为2-10mmol/L)和NHS(终浓度为5-20mmol/L )；加入25℃反应15-45分钟后，加入终浓度为5-20mM的巯基乙醇，得到活化后的吖啶-多聚赖氨酸；
（3）在加入1mg抗TSH抗体，混匀，置于25℃反应0.5-2h，用5mL 7KD截留分子量的脱盐柱(Thermofish公司)以10-200mM PBS（pH7.4）缓冲液作为换液缓冲液，过柱3遍，除去游离的NHS及反应副产物，得到结合物吖啶酯-多聚赖氨酸-TSH抗体溶液。
3.根据权利要求1所述的芯片，其特征在于步骤（3）中所述hemin标记TSH抗体的方法为：
（1）在5-20mmol/L hemin水溶液中加入NHS(终浓度为5-20mmol/L )；加入25℃反应15-45分钟后，加入终浓度为5-20mM的巯基乙醇，得到活化后的氯化血红素；
（2）在加入1mg抗TSH抗体，混匀，置于25℃反应0.5-2h，用5mL 7KD截留分子量的脱盐柱(Thermofish公司)以10-200mM PBS( pH 7 .4)缓冲液作为换液缓冲液，过柱3遍，除去游离的NHS及反应副产物，得到结合物氯化血红素-TSH抗体溶液。
4.一种权利要求1~3任一项所述试剂盒的应用，其特征在于将所述试剂制成试剂盒。
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