[发明专利]用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR引物组合物、试剂及控制系统

权利要求书

1.一种用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR引物组合物，其特征在于：包括SEQID NO:01至SEQ ID NO:46所示的引物。

2.一种用于BRAF基因全外显子二代测序的试剂，其特征在于：包括权利要求1所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR引物组合物及二代测序所需试剂。

3.根据权利要求1或2所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR引物组合物，其特征在于：

所述多重PCR引物组合物通过如下处理方法获得：

将SEQ ID NO：01~ SEQ ID NO：06、SEQ ID NO：09~ SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：13~ SEQID NO：16、SEQ ID NO：21~ SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：33~ SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：39~SEQ ID NO：40所示的引物记为A类；

SEQ ID NO：07~ SEQ ID NO：08、SEQ ID NO：11~ SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：17~ SEQID NO：20、SEQ ID NO：27~ SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：37~ SEQ ID NO：38、SEQ ID NO：41~SEQ ID NO：46所示的引物记为B类；

将所述A类、所述B类分别混合，分别进行多重PCR扩增处理后，产物加于一管，共同进行凝胶电泳鉴定多重PCR的产物长度可直接用于测序仪后，进行后续实验。

4.一种用于BRAF基因全外显子二代测序的控制系统，其特征在于，包括：

检测模块，采用权利要求2所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的试剂进行多重PCR二代测序；

显示模块，将检测结果转换为可视化数据，并将可视化的数据于显示设备进行展示；

分析模块：基于预设的质控程序对检测结果进行验证，并将验证结果于同一显示设备进行展示。

5.根据权利要求4所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的控制系统，其特征在于：

运行所述检测模块，包括以下步骤：

步骤一：将全部的引物分为两组，分别震荡混匀备用；

步骤二：两组引物分别进行多重PCR扩增；

步骤三：两组引物共同进行凝胶电泳；

步骤四：文库构件，包括PCR产物纯化、末端修复、接头连接、片段筛选、文库PCR扩增、文库扩增产物纯化；

步骤五：测定DNA产物浓度；

步骤六：将扩增子碱基数*给定的深度，按计算结果将样品混合后稀释到上机浓度；

步骤七：油包水扩增、末班序列富集；

步骤八：置于测序仪进行测序，获得检测结果。

6.根据权利要求5所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的控制系统，其特征在于：

所述显示模块将步骤八中的检测结果转化为包括“7号染色体概图”、“测序结果”、“参考序列”三项数据的图表。

7.根据权利要求6所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的控制系统，其特征在于：

所述分析模块直接以所述显示模块转化得到的图表为原始数据，与预设的数据进行对比，并向所述显示模块输出检测结果。