[发明专利]一种近红外光调控基因编辑方法有效
| 申请号： | 201910257116.6 | 申请日： | 2019-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN109971790B | 公开（公告）日： | 2022-06-10 |
| 发明（设计）人： | 宋玉君;潘永春 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 薛海霞;董建林 |
| 地址： | 210000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 红外光 调控 基因 编辑 方法 | ||
1.一种可用于红外光基因编辑的UCNPs-Cas9@PEI复合体，其特征在于：
该复合体的制备过程为：将纳米粒子UCNPs@SiO2表面进行羧酸化，然后借助光敏分子将CRISPR/Cas9体系和纳米粒子UCNPs@SiO2共价连接得到UCNPs-Cas9复合体，其中CRISPR/Cas9体系包括Cas9蛋白和目标基因的sgRNA，并在静电吸附的作用下，在UCNPs-Cas9复合体最外层包裹上带正电的PEI，得到UCNPs-Cas9@PEI复合体；当把UCNPs-Cas9@PEI复合体递送进细胞或者小鼠，可在红外光调控下实现基因编辑。
2.根据权利要求1所述的UCNPs-Cas9@PEI复合体，其特征在于：
所述的UCNPs@SiO2是包裹了一层二氧化硅的上转换纳米粒子，其中上转换纳米粒子为NaYF4:Yb/Tm。
3.根据权利要求1所述的UCNPs-Cas9@PEI复合体，其特征在于：
所述的羧酸化过程采用的分子为N-三甲氧基硅丙基乙二胺三乙酸三钠盐，羧酸化反应时N-三甲氧基硅丙基乙二胺三乙酸三钠盐的浓度6 μg/mL。
4.根据权利要求1所述的UCNPs-Cas9@PEI复合体，其特征在于：
所述的光敏分子为4-羟甲基-3-硝基苯甲酸，光敏反应时4-羟甲基-3-硝基苯甲酸浓度为10 μg/mL。
5.根据权利要求1所述的UCNPs-Cas9@PEI复合体，其特征在于：
所述的Cas9蛋白和sgRNA质量比为1:2。
6.根据权利要求1所述的UCNPs-Cas9@PEI复合体，其特征在于：
所述的PEI中文名称为聚乙烯亚胺，PEI与加入的sgRNA质量比为5:1。
7.根据权利要求1所述的UCNPs-Cas9@PEI复合体，其特征在于：
所述的UCNPs-Cas9@PEI复合体中的UCNPs@SiO2终浓度为3.5 mg/mL，Cas9 蛋白终浓度0.36 μg /mL，sgRNA 终浓度0.72 μg /mL。
8.根据权利要求1所述的UCNPs-Cas9@PEI复合体，其特征在于：
所述的红外光调控过程中，采用的红外光波长980 nm，光照时长20 min。
9.一种近红外光调控基因编辑方法，其特征在于，包括如下步骤：
将权利要求1~8任一项所述的UCNPs-Cas9@PEI复合体，在980 nm红外光照射下实现对目标基因的编辑。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，目标基因包括
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京大学，未经南京大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910257116.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
