[发明专利]一种对过氧化氢特异性响应的基因编码型荧光生物探针及其构建方法和用途

权利要求书

1.一种对过氧化氢特异性响应的基因编码型荧光生物探针的构建方法，其特征在于，所述构建方法为将对过氧化氢特异性敏感的PrxA和TrxA分别融合到cpYFP荧光蛋白的两端，具体包括：

步骤1：将SEQ ID NO. 1所示的TrxA氨基酸序列的第39位半胱氨酸替换为极性氨基酸，得到TrxA突变体；

步骤2：将SEQ ID NO. 2所示的编码PrxA的核酸序列、步骤1中所得的TrxA突变体的核酸序列和SEQ ID NO. 3所示的编码cpYFP的核酸序列进行融合，得到过氧化氢特异性响应的基因编码型荧光生物探针；

所述TrxA突变体位于cpYFP的氮端或碳端，中间插入连接肽X1，所述X1是GGGS，GGGGS，SAG，GT，LAEAAAKEAA，TSGSPGLQEFGT中的任意一种；

所述PrxA位于cpYFP的碳端或氮端，中间插入连接肽X2，所述X2是GGGS，GGGGS，SAG，GT，LAEAAAKEAA，TSGSPGLQEFGT中的任意一种。

2.利用权利要求1所述构建方法制备获得的对过氧化氢特异性响应的基因编码型荧光生物探针。

3.一种多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子的核酸编码如权利要求2所述的对过氧化氢特异性响应的基因编码型荧光生物探针。

4.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒表达载体包含编码权利要求3所述的多核苷酸分子基因。

5.权利要求2所述的对过氧化氢特异性响应的基因编码型荧光生物探针在过氧化氢或有机过氧化物的检测中的应用。