[发明专利]一种季也蒙毕赤酵母及分泌的胞外蛋白的应用

说明书

本发明为一种季也蒙毕赤酵母及分泌的胞外蛋白的应用，涉及微生物技术领域，具体涉及一种利用季也蒙毕赤酵母高效合成赛门苷I的方法；所述的应用通过季也蒙毕赤酵母（Meyerozyma guilliermondii）的分泌的胞外蛋白实现催化功能；该胞外蛋白具有较强的催化活性，具有催化效率高，反应条件温和，特异性强等特点，有望为高效合成赛门苷I的理想催化剂，拓宽赛门苷I的来源。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种利用季也蒙毕赤酵母高效合成赛门苷I的方法。

背景技术

罗汉果(Siraitia grosvenorii)是广西道地药材，对生境的要求较严格，主要垂直分布于海拔250～1000m的亚热带有坡地区，分布区多有苔藓、兰科植物、油茶林和竹林等植物；罗汉果要求生长在昼夜温差较大、环境湿润的地区，最适温度为25～30℃，空气相对湿度为70％～85％；喜光但不耐强光，怕霜冻；适宜栽培在排水较好、有机质丰富、疏松湿润的红黄壤土中。桂林的临桂、永福、兴安、资源、龙胜、灵川栽培面积最大，也是我国最大的罗汉果生产基地。罗汉果有凉血解暑、滑肠通便、化痰止咳、舒胃、清肺和生津止渴等功效，临床用于治疗肠燥便秘、高血压和呼吸系统疾病，同时具有一定抗菌作用，对消化系统疾病也有较好的疗效。目前，以罗汉果为主要原料已经制成的中药有罗汉果咽喉片、镇咳祛痰合剂、罗汉果止咳露、止咳定喘片、罗汉果止咳剂等(黎霜等，2003)。罗汉果甜苷类物质甜度高、热值低、水溶性与热稳定性好。无毒，食用安全，没有异味，因此广泛应用于食品及保健品工业中。近年来，罗汉果被制成汁粉、果糕、柿饼汤、面包、果凉茶、单晶冰糖等食品和保健品；罗汉果在国外市场也非常受欢迎，日本、韩国、英国、新加坡等国先后批准罗汉果可以作为食品添加剂，特别是用罗汉果制成的高级润喉糖、罗汉果果汁等产品在日本深受人们的喜爱。

目前从罗汉果果实中提取和鉴定的葫芦烷型三萜类成分有：罗汉果苷Ⅳ、罗汉果苷Ⅴ、罗汉果皂苷ⅣA、罗汉果二醇Ⅰ苯甲酸酝、罗汉果新苷、罗汉果苷Ⅲ、罗汉果皂苷ⅡA1、赛门苷Ⅰ、11-氧化-罗汉果苷Ⅴ、罗汉果ⅡE、罗汉果苷ⅢE和罗汉果苷A等(杨秀伟等，2008)。以上成分是罗汉果的主要甜味成分，在罗汉果干果中的总含量为3.755％～3.858％。罗汉果中含有多种皂苷成分，目前已从罗汉果中分离并鉴定30多种葫芦烷型三萜皂苷，其中罗汉果苷IV、V和赛门苷I是迄今为止报道的罗汉果甜苷中甜度最高的3种成分，分别为蔗糖甜度的392，425和563倍。赛门苷I是葫芦烷三萜苷中最甜的成分，赛门苷I(0.01％浓度)的为5％蔗糖甜度的563倍。

此外，体外试验表明赛门苷对麦芽糖酶有抑制作用，Suzuki等研究发现，罗汉果苷提取物(包含罗汉果苷V，IV，III，赛门苷I等)对单剂量口服麦芽糖大鼠餐后血糖具有强烈的抑制作用，IC₅₀分别为14,12,10和1.6mM。日本学者Konoshima等在罗汉果甜苷的病毒抑制作用试验中,发现赛门苷I可抑制病毒的生长。赛门苷I还具有很强的降血糖血压的功用。Yasushi A.Suzuki等研究罗汉果粗提物对餐后血糖浓度增加的影响，实验发现，大鼠摄入麦芽糖之前3分钟口服罗汉果粗提物，血浆中葡萄糖浓度的增高得到显著的抑制，但摄入葡萄糖时没有抑制作用。试验结果表明罗汉果赛门苷I对麦芽糖酶有抑制能力。

然而，当前赛门苷I的生产与制备主要是通过植物提取获得，但是植物类含量极低，严重制约着赛门苷I的大规模应用，在过去的十年里文献报道了用植物组织培养法生产赛门苷I的方法，一般都是通过添加诱导物诱导植物细胞生产赛门苷I。目前，尚未有大量制备和生产赛门苷I的公开报道。

发明内容

本发明的目的是提供季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)的新用途，该菌株能生产胞外蛋白，该胞外蛋白具有高效催化合成赛门苷I的作用，将为赛门苷I大规模生产提供新的思路。