[发明专利]一种TD1修饰的Syn-Hycan及其制备方法

说明书

本发明提供一种TD1修饰的Syn‑Hycan，其特征在于，将TD1和Syn‑Hycan通过TD1赖氨酸的侧链上的氨基基团连接起来形成新型衍生多肽，本发明还提供了该新型衍生多肽的固相合成方法。该衍生多肽能透过角质层并作用于真皮，使Syn‑Hycan能高效发挥作用。

技术领域

本发明涉及多肽应用领域，特别涉及一种TD1修饰的Syn-Hycan的制备方法及其应用。

背景技术

Syn-Hycan是一种新型三肽的三氟乙酸衍生物，分子式为C₂₈H₂₆N₆O₅·2C₂HF₃O₂，肽序是Tetradecyl aminocarbonyl-Dab-Val-Dab-OH。使用Syn-Hycan刺激人成纤维细胞能增加透明质酸(Hyaluronan)的合成，进一步促使水分进入细胞间隙，并与蛋白质结合而形成蛋白凝胶，达到保湿、增加皮肤弹性与张力，改善干燥及松弛皮肤的作用。Syn-Hycan还能刺激人成纤维细胞能增加核心蛋白聚糖(Decorin)和/或Lumican的合成，促进胶原蛋白的生长，从而促进疤痕愈合，加速皮肤组织修复。

改善皮肤健康或增强皮肤外观的美容成分也必须横穿皮肤的最外层(角质层)递送。然而皮肤的有效环境屏障作用使药物和美容成分两者横穿角质层的递送变得复杂。角质层阻止许多分子(诸如大分子、蛋白质药物和带电小分子)穿过其屏障。目前输送药物和美容物质穿过角质层的方式主要是利用物理和化学法破坏角质层。物理法通常是具有较低的患者顺应性的诸如超声促渗、离子导入、皮下注射等。尽管使用化学渗透增强剂已取得成效，但它们通常不能输送大的亲水性化合物、蛋白质物质或带电小分子穿过角质层。此外，化学渗透增强剂可能会造成皮肤刺激。

TD1是具有11个氨基酸序列的透皮短肽,其序列为ACSSSPSKHCG，该短肽能携带胰岛素通过皮肤进入体内，起到治疗作用。自从TD1被发现以来，利用其能够增强亲水性蛋白药物透皮能力而进行的理论与应用研究已经获得显著成果。目前，关于TD1增强蛋白透皮能力的机理尚不明确，但是其透皮能力具有很高的序列特异性和剂量依赖性，其透皮机制在于皮肤本身与皮肤的相互作用，而并非肽与药物之间的作用。在TD1的应用中，TD1与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达后，比普通GFP更容易穿过皮肤。

发明内容

本发明提供了一种TD1修饰的Syn-Hycan及其制备方法，促进Syn-Hycan高效透过角质层，作用于真皮层，最终达到保湿、改善干燥、加速皮肤修复等功效。

具体地，本发明提供了一种TD1修饰的Syn-Hycan，其特征在于，TD1与Syn-Hycan的连接位点为TD1赖氨酸的侧链上的氨基基团，该新型衍生多肽的结构为：

本发明还提供了一种制备TD1修饰的Syn-Hycan的方法，包括以下步骤：

步骤1：以十四胺、羰基二咪唑(CDI)、H-Dab(Boc)-OH.HCl为原料经过两步合成得到Tetradecyl aminocarbonyl-Dab(Boc)-OH；

步骤2：以固相载体树脂为起始树脂，依据固相偶联方式依次与Fmoc-Dab(Boc)-OH,Fmoc-Val-OH缩合得到H-Val-Dab(Boc)-Resin；

步骤3：以Tetradecyl aminocarbonyl-Dab(Boc)-OH、H-Val-Dab(Boc)-Resin为原料，在缩合剂作用下偶联得到

Tetradecyl aminocarbonyl-Dab(Boc)-Val-Dab(Boc)-Resin，再以TFA裂解液裂解得到Tetradecyl aminocarbonyl-Dab-Val-Dab-OH；