[发明专利]一测多评法评价白蔹质量的方法

说明书

本发明提供一种一测多评法评价白蔹质量的方法，首先建立白蔹中3种主要药效成分的HPLC含量测定方法，以白藜芦醇作为内参物，计算其他2种活性成分的相对校正因子，并考察相对校正因子的系统适用性和方法重现性，根据相对保留时间进行色请峰定位，再结合相对校正因子算各待测成分的含量，通过一测多评法与外标法的相互验证，证明含量测定结果无显著差异。本发明方法克服了对照品成本高、不易得等难题，通过相对校正因子及色谱峰定位计算指标成分含量，实现白蔹中多种药效物质的同步测定，可节省成本、简化操作，提高效率，且检测灵敏度高，稳定性好，测定结果准确可靠，对白蔹质量控制和临床疗效的保证具有重大意义。

技术领域

本发明属于药物质量控制技术领域，具体涉及一种一测多评法评价白蔹质量的方法。

背景技术

白蔹为葡萄科蛇葡萄属植物，白蔹(Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino)的干燥块根，具有清热解毒、消痈散结、敛疮生肌等功效，临床上多用于治疗痈疽发背，疔疮，烧烫伤等症状。白蔹药材中没食子酸、原儿茶酸和白藜芦醇的含量相对较大，没食子酸具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化的作用，对心血管系统、神经系统、糖尿病、肝纤维化和肿瘤等疾病都具有防治作用；原儿茶酸对大鼠心肌缺血/再灌注损伤有保护作用，并具有抗菌、抗动脉硬化的作用；白藜芦醇可减少心肌缺血-再灌注损伤、舒张血管、抗动脉粥样硬化，并能抗菌、抗病毒，具有免疫调节作用。这些成分的药理作用均与白蔹的功效具有相关性。若通过只测定中药材中的一个成分，来实现多个成分的同步测定，则会在很大程度上简化白蔹药材的定量检测方法。

一测多评法(quantitative analysis of multicomponents by single marker，QAMS)指利用中药有效成分内在的函数关系和比例关系，只测定其中的一个成分(对照品易于得到)来实现多个成分(对照品难以得到或供应)的同步测定，是适合中药特点的多指标质量评价模式。在对照品不足的情况下，利用相对校正因子(relative correctionfactor，RCF)对药材进行质量控制是方便、快速、廉价的，其方法将会是中药多组分同步定量的发展方向。

目前，用一测多评法评价中药材质量的相关文献较少，而用一测多评法同时测定白蔹中多种不同类型成分的含量的未见报道。虽已有文献报道采用HPLC切换波长法测定白蔹中没食子酸、原儿茶醛、儿茶素和白藜芦醇的含量，但所用标准品品种多，并且含量测定方法复杂，检测经济成本较高，限制了通过对白蔹进行主要活性成分含量测定来控制其质量在实际工作中的应用。

为了更加全面有效的控制白蔹药材的质量，本实验将以没食子酸等多个有效成分为定量指标，建立白蔹一测多评的质量评价方法，考察一测多评法对白蔹的含量测定的准确性与可行性。

发明内容

本发明的目的是提供一种一测多评法评价白蔹质量的方法，解决了现有技术中白蔹在含量测定时标准品品种多，含量测定方法复杂，检测经济成本较高的问题，简化了白蔹定量检测方法，节约了白蔹的质量控制的检测经济成本。

本发明所采用的技术方案是，一测多评法评价白蔹质量的方法，具体按照以下步骤进行：

步骤1、对照品标准溶液制备

步骤1.1、分别取没食子酸标准品、白藜芦醇标准品以及原儿茶酸标准品，用甲醇溶解后置于容量瓶、定容，即得没食子酸标准溶液、白藜芦醇标准溶液以及原儿茶酸标准溶液；

步骤1.2、分别取一定量的没食子酸标准溶液、白藜芦醇标准溶液以及原儿茶酸标准溶液混合后置于容量瓶中，用甲醇定容，得到混合对照品溶液；

步骤2、供试品溶液制备

将白蔹粉碎，过40目筛网，经提取、抽滤后，将滤液置于水浴锅上蒸干得滤渣，将滤渣溶解于甲醇后置于容量瓶、定容后，过微孔滤膜，得到供试品溶液，备用；

步骤3、高效液相色谱测定